换一批
换一批摘要目的：有报道表明staurosporine作为一种蛋白激酶C(PKC)的抑制剂，可以在多种细胞系内调节细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的活性，但是它的衍生物staurosporine aglycone是否具有相同的作用还不清楚，本次实验旨在阐明staurosporine aglycone(SA)对ERK1/2活性的调节作用。 方法：原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞，取培养至4—8代的细胞，在不同条件下应用各种浓度的SA处理后提取细胞蛋白，或直接分离大鼠肺动脉提取蛋白，应用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的含量，观察不同浓度和时间点的SA对ERK1/2活性的影响。 结果：在纳摩尔浓度水平的SA可以降低大鼠肺动脉平滑肌细胞中ERK1/2的磷酸化水平，但是30μmol/L的SA可以激活ERK1/2，这种激活作用可以被丝裂素活化蛋白激酶的激酶(MEK)的抑制剂PD98059(50μmol/L)或蛋白激酶A(PKA)的激活剂异丙。肾上腺素(isoproterenol)所抑制。 结论以上结果表明，SA对大鼠肺动脉平滑肌细胞中的ERK1/2活性有双向调节作用，即再低浓度时起抑制作用，高浓度时起激活作用，而这种作用是通过PKC和/或PKA通路产生的。
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