摘要目的:本实验旨在运用生化、病理形态学、免疫组织化学、分子生物学以及计算机图像分析仪技术半定量评价等多种方法多角度、多靶点的探讨中药保肾汤改善腺嘌呤灌胃复制大鼠肾纤维化模型有效性及作用机理,并为探寻中医药治疗肾纤维化提供实验依据,为今后指导临床提供新的思路和方法。<br> 材料与方法:运用腺嘌呤灌胃造模的方法建立实验性肾纤维化大鼠模型,除肉眼观察肾组织外观形态外,采用先进的理化诊察方法如光学显微镜等现代检测技术,分析验证模型的成功建立,将雌雄各半的50只大鼠按体重(200±20克)随机分为4组,即正常组、模型组、保肾汤组、阿魏酸哌嗪组。模型组14只,其余每组12只。正常组:每天给予生理盐水1ml/100g(体重)日一次灌胃,连续56天;模型组:连续灌胃造模56天;保肾汤组:造模后第4周起,每天上午造模方法同前,每天下午给予保肾汤1ml/100g(体重)日一次灌胃,连续28天;阿魏酸哌嗪组:造模后第4周起,每天上午造模方法同前,每天下午给予阿魏酸哌嗪1ml/100g(体重)日一次灌胃,连续28天。以上各组大鼠均在第56天上午8:00时腹腔麻醉处死,迅速剖腹取腹主动脉血、肾脏,用光学显微镜观察肾组织病理表现,用全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr);采用免疫组织化学方法,进行半定量分析,检测肝细胞生长因子HGF、骨成形蛋白BMP-7;使用SPSS11.0软件进行统计分析。<br> 结果:<br> 1.与正常组比较模型组和两个治疗组血尿素氮水平显著升高(P<0.01);阿魏酸哌嗪组、保肾汤组与模型组比较血尿素氮水平显著降低(P<0.01);阿魏酸哌嗪组与保肾汤组比较没有显著差异(P>0.05)。<br> 2.与正常组比较模型组和两个治疗组血肌酐水平显著升高(P<0.01);阿魏酸哌嗪组、保肾汤组与模型组比较血肌酐水平显著降低(P<0.01);阿魏酸哌嗪组与保肾汤组比较没有显著差异(P>0.05)。<br> 3.与正常组比较模型组和两个治疗组HGF都显著升高(P<0.01或P<0.05);与模型组比较两个治疗组表达显著升高(P<0.01)。两个治疗组之间比较没有差异(P>0.05)。各组在两个时点进行前后自身比较,正常组没有显著差异(P>0.05),模型组和两个治疗组都显著降低(P<0.01)。<br> 4.与正常组比较模型组和两个治疗组肾组织BMP-7相对含量表达都显著降低(P<0.01);与模型组比较两个治疗组表达显著升高(P<0.01)。两个治疗组之间比较没有差异(P>0.05)。<br> 5.肉眼和电镜观察肾组织造模各组都有不同程度的肾纤维化表现。肾纤维化各模型组大鼠肾组织淡棕黄色的阳性表达增加,以模型组最重。<br> 结论:<br> 1.保肾汤能够明显改善腺嘌呤灌胃复制肾纤维化大鼠模型肾组织的病理损伤,具有保护和修复肾脏组织,延缓肾纤维化进程的作用。<br> 2.保肾汤能够明显降低血清尿素氮、肌酐水平。<br> 3.保肾汤能够增强腺嘌呤灌胃复制肾纤维化大鼠模型肾组织中HGF的表达及分布,具有延缓。肾纤维化进程的作用。<br> 4.保肾汤能够增强腺嘌呤灌胃复制肾纤维化大鼠模型肾组织中BMP一7的表达及分布,具有延缓肾纤维化进程的作用。<br>
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