硫矿硫化叶菌P2假定蛋白SSO2628的表达纯化及聚合状态初步研究-论文-万方医学网

硫矿硫化叶菌P2假定蛋白SSO2628的表达纯化及聚合状态初步研究

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摘要硫矿硫化叶菌P2（Sulfolobus solfataricus P2）假定蛋白SSO2628全长120个氨基酸，分子量13．4KDa，结构和功能未知。经BLAST同源性搜索，共有18个蛋白质与SSO2628序列一致性在32％到90％之间，其中同源性最高的三个蛋白具有DsrE超家族结构域，含此结构域的相关蛋白YchN、MTH1491和DsrEFH的晶体结构已经测定，以三聚体或六聚体存在。<br>　　本文对SSO2628进行表达纯化，最终1L LB培养基SSO2628产量约为40mg。SSO2628在大肠杆菌中主要以可溶形式表达，相继以镍柱亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化。收集各洗脱峰，进一步应用凝胶过滤层析、超离心分析、圆二色光谱和一维核磁共振氢谱进行分析。研究表明SSO2628在溶液中以稳定的二聚体和三聚体形式共同存在，聚合状态与已知结构的相关蛋白存在差异。本文根据蛋白质结构和功能密切相关的性质，从相关蛋白结构域和氨基酸序列中“C××C” motif的保守性讨论SSO2628的功能，推测其参与细胞内硫元素的代谢过程。