E2F转录调控POLD1启动子的初步研究-论文-万方医学网

E2F转录调控POLD1启动子的初步研究

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摘要E2F作为一种重要的转录因子在细胞周期进程中发挥着非常重要的作用。它调节了许多重要的细胞周期相关基因的转录。DNA复制在细胞中受到了精确的调控，每个细胞周期基因组DNA都只能复制一次。在DNA复制过程中DNA聚合酶δ的作用最为重要，其催化亚基p125在细胞中的表达具有细胞周期依赖性。本论文研究工作为E2F对POLD1基因的转录调控机理提供了初步的依据，丰富了POLD1基因的转录调控研究。为今后进一步深入的研究提供了基础。<br>　　本论文中主要通过染色体免疫共沉淀证明了E2F1与E2F4在细胞内能够与POLD1的启动子结合并能以促进型转录因子的作用调节p125的表达。同时能够促进POLD1启动子的转录活性。将细胞同步化后分析结果显示两种转录因子都在G1/S期与POLD1启动子结合水平最高。<br>　　为了进一步研究这种转录调控作用，向细胞中转染了p21使细胞内的p21表达水平提高，发现p21影响了细胞中E2F1与POLD1启动子的结合情况，抑制了E2F1与POLD1启动子的结合，但对E2F4与POLD1启动字的结合没有明显影响。同时p21能够抑制E2F1、E2F4对POLD1启动子活性的促进作用。推测E2F4可能以一种不同的方式对POLD1进行着转录调控作用。<br>　　使用抗肿瘤药物阿霉素处理细胞发现该药物降低了细胞中DNA聚合酶δ催化亚基p125的蛋白表达水平。进一步的实验表明，阿霉素通过提高p21水平及对E2F1蛋白表达的抑制进一步抑制了POLD1的转录水平。