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摘要蓝藻是地球上最早出现的能进行放氧型光合作用的原核生物，能够利用太阳光、CO2和无机营养物合成自身生长所需的糖类、蛋白质和脂类等有机物。蜡酯是由长链脂肪酸和长链脂肪醇酯化形成的一类氧酯，在一些动物、植物体内和微生物细胞中有积累。蜡酯可用于精密仪器润滑油原料及药物、食品和化妆品的添加剂等，有很高的商业价值，但资源有限，价格较昂贵。本研究第一部分将细菌和哺乳动物蜡酯合成相关的基因导入蓝藻中，培育能够合成蜡酯的转基因藻株，为能够大量生产低成本蜡酯提供了新的途径。柴油作为一种重要的石油炼制产品，在各国燃料结构中占有较高的比例，而石油资源的日益枯竭促使世界各国开发柴油替代燃料。生物柴油以其优越的环保性能越来越受到重视。本研究的第二部分是将两个细菌的两个乙醇合成基因和一个蜡酯合成基因导入大肠杆菌中，构建能够产生乙酯生物柴油的菌株。<br>　　 研究内容和结果如下：<br>　　 1.从小白鼠KM株中通过RT-PCR克隆了编码脂肪酰辅酶A还原酶1的cDNA序列(FAR1 cDNA)，并将该基因和克隆自不动杆菌ADP1株的蜡酯合成酶/二酰甘油酰基转移酶基因(wax/dgat)共同置于蓝藻启动子PrbcL的控制下，构建穿梭表达质粒。通过接合转移将穿梭表达质粒导入鱼腥藻PCC7120(本文称WT)及其衍生藻株EF113(本文称EF113)中，筛选得到了能够合成蜡酯的转基因藻株。EF113的转基因株产蜡量高于WT的转基因株，可达细胞干重的1％。<br>　　 2.从运动发酵单胞菌中克隆了丙酮酸脱羧酶基因(pdc)和乙醇脱氢酶基因(adhB)。构建表达质粒将pdc、adhB和不动杆菌中的wax/dgat三个基因共同以lacZ启动子在E.coli DH5α表达。重组菌株在培养基中外加葡萄糖和油酸钠的条件下能够积累脂肪酸乙脂。