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摘要阿片类镇痛药物临床上主要用于中度或重度疼痛的治疗。但是长期慢性使用后可导致药物依赖与耐受，限制了这类药物的临床应用。有关阿片类物质耐受与依赖形成的分子机制目前仍不明确。有研究表明，慢性阿片处理能降低神经元细胞膜Na+，K+-ATPase活性引起神经元去极化，从而导致阿片耐受与依赖。目前，有关吗啡调控Na+，K+-ATPase活性的分子作用机制仍不清楚。大量证据表明，慢性吗啡处理引起cAMP/cAMP-依赖性蛋白激酶(PKA)信号通路的上调参与了吗啡依赖与耐受的形成。因此，本论文主要考察cAMP/PKA信号通路是否介导了急、慢性吗啡对动物海马、纹状体Na+，K+-ATPase活性的调控。此外，中枢神经系统中多巴胺能神经系统与阿片能神经系统存在着相互作用，本论文还考察了急、慢性调控纹状体Na+，K+-ATPase的活性是否与活化多巴胺受体有关。急性吗啡处理能剂量依赖性地刺激海马、纹状体Na+，K+-ATPase的活性。预先绐予腺苷酸环化酶活化剂forskolin、PKA活化剂db-cAMP也能显著拮抗这种刺激作用。与急性处理相反，慢性吗啡能显著抑制Na+，K+-ATPase的活性，纳洛酮催瘾后Na+，K+-ATPase的活性进一步下降。预先给予阿片受体拮抗剂钠曲酮能完全阻断这种吗啡对Na+，K+-ATPase活性的调控作用。吗啡对Na+，K+-ATPase活性的调控与胞内cAMP含量负相关，即急性吗啡下调cAMP含量，慢性吗啡上调cAMP含量，而纳洛酮催瘾后cAMP进一步上升。PKA特异性抑制剂H-89能模拟急性吗啡对Na+，K+-ATPase活性的刺激作用，而拮抗慢性吗啡对Na+，K+-ATPase活性的抑制作用。蛋白磷酸酶抑制剂okadaic acid能显著拮抗急性吗啡的刺激作用而强化慢性吗啡的抑制作用。急、慢性吗啡处理均不能引起神经元胞浆膜Na+，K+-ATPase蛋白αl及α3亚基蛋白表达丰度的改变。免疫沉淀及免疫印迹结果表明，急性吗啡能显著下调Na+，K+-ATPase蛋白α3亚基的磷酸化水平，而慢性吗啡能显著上调Na+，K+-ATPase蛋白α3亚基的基础磷酸化水平。急、慢性吗啡处理均不能引起神经元胞浆膜Na+，K+-ATPase蛋白αl亚基的基础磷酸化水平。钠曲酮预处理能完全阻断这种调控作用，慢性吗啡处理后给予H-89能显著拮抗这种上调作用。预处理D2多巴胺受体阻断剂eticlopride能显著拮抗急性吗啡对纹状体Na+，K+-ATPase活性的刺激作用，D1多巴胺受体阻断剂SCH23390无此作用。体外实验表明，eticlopride不能拮抗吗啡对纹状体突触体膜Na+，K+-ATPase活性。预处理SCH23390能显著拮抗慢性吗啡对纹状体Na+，K+-ATPase活性的抑制作用，而eticlopride无此作用。预处理eticlopride能拮抗急性吗啡对纹状体胞浆PKA活性及Na+，K+-ATPase蛋白α3亚基的基础磷酸化水平的下调作用；预处理SCH23390能拮抗慢性吗啡对纹状体胞浆PKA活性及Na+，K+-ATPase蛋白α3亚基的基础磷酸化水平的上调作用。本文首次证明了急、慢性吗啡通过cAMP/PKA信号通路特异性调控Na+，K+-ATPase蛋白α3亚基的基础磷酸化水平从而调节Na+，K+-ATPase活性。在受体水平上，吗啡的这种调控作用与海马和纹状体内阿片受体的直接活化有关；在纹状体，这种调控作用还与多巴胺受体的间接活化有关。cAMP/PKA信号通路上调导致的Na+，K+-ATPase活性下降可能是慢性吗啡处理引起耐受与依赖的潜在机制之一。