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摘要本研究主要分为两部分的内容，第一部分体外克隆表达了SARSCoV主要结构蛋白N、S，并进一步对重组蛋白抗原性进行了进行了分析。第二部分开展了针对感染性疾病病原体的新型检测技术研究，建立了敏感特异的实时荧光PCR检测技术和针对未知病原体的高通量检测技术。<br>　　 为了对SARSCoV主要结构蛋白N、S的抗原性进行研究，采用pQE30载体系统体外克隆表达了SARSCoV N、tN、tS、tS-tN等重组蛋白。对重组蛋白的抗原特异性分析表明tN、tS、tS-tN具有种特异性，而N蛋白则与其它两种人冠状病毒(HCoV229E，HCoVOC43)存在抗原交叉。在作为ELISA检测抗原方面，融合蛋白具有很好的敏感性(99.35％，457/460)，而单一蛋白的敏感性分别为91.7％(422/460，N蛋白)，90.7％(417/460，tN蛋白)和86.5％(398/460t，S蛋白)。进一步对重组蛋白的免疫原性研究表明： N蛋白、tS蛋白、tS-tN融合蛋白都能够刺激机体T淋巴细胞增殖，中和实验表明tS蛋白、tS-tN融合蛋白能够刺激机体产生中和抗体。进一步的免疫攻击实验表明tS-tN融合蛋白接种小鼠后，能够有效抑制SARSCoV复制。<br>　　 在感染性疾病病原体的新型检测技术研究中，针对SARS、禽流感Ⅱ5型病毒等高危害病原体建立了敏感特异的荧光PCR检测方法，研究结果表明，新型的SARS、AIV-H5实时荧光PCR检测方法，具有很高的敏感性和特异性，检测灵敏度分别达到2-4拷贝/反应，6拷贝/反应，特异性为100％。针对SARS病人的早期发病样本，检出率达到75％以上，能够由于疾病的早期监测。此外，针对未知病原体，我们结合高通量测序技术的发展，采用随机基因组扩增技术，建立了高通量随机分析技术。研究结果表明，采用随机高通量分析技术，能够直接针对各种实际样本，有效的检测未知和新发传染病病原体，为生物安全提供有效技术保障。