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摘要目的：建立豚鼠镜片诱导型近视眼模型（Lens induced myopia，LIM），观察豚鼠眼球前部及后极部视网膜色素上皮（RPE）细胞中肝细胞生长因子（HGF）的表达变化。研究HGF在近视中的作用，并采用激光扫描共聚焦显微镜（SLCM）对正常组和LIM组RPE细胞的钙离子进行测定，从离子水平进一步探讨近视的发病机理。<br>　　 方法：取2周龄豚鼠10只，随机选取一只眼为实验眼（LIM组）对侧眼为自身对照眼（Self-control，SC组）。实验眼是采用离焦点的方法用-10.00D[1]凹透镜诱导成近视眼模型，实验前后检测每组豚鼠双眼屈光状态，用A超测双眼眼轴长度。用细胞酶消化法原代培养豚鼠眼球前部及后极部RPE细胞，并传1代。用免疫细胞化学法对培养细胞进行鉴定，并对每组前部及后极部RPE细胞HGF的表达进行定性半定量分析，用逆转录.多聚酶链反应（RT-PCR）法检测前部及后极部RPE细胞HGFmRNA的表达。对豚鼠RPE细胞进行Fluo-3/AM负载，利用激光扫描共聚焦显微镜测定LIM组及SC组RPE细胞钙离子的变化。其结果用SPSS12.0统计软件进行统计分析。<br>　　 结果：<br>　　 1豚鼠实验性近视的诱导结果：豚鼠经过45天的凹透镜诱导，实验组与自身对照组比较，诱导出-6.70±1.93D的相对近视，眼轴延长了1.53±0.31mm，前后变化差异有显著意义（p<0.05）。<br>　　 2细胞培养及鉴定结果：豚鼠RPE细胞培养后2-3天开始有细胞贴壁生长，1周左右汇合，免疫细胞化学鉴定为RPE细胞。<br>　　 3免疫细胞化学研究结果：HGF在RPE细胞中的表达定位于细胞浆，细胞核无着色。LIM组前部和后极部表达多呈棕黄色，为+++；SC组前部和后极部表达多浅黄色，为+；LIM组和SC组各组自身前部及后极部比较，无显著性差异（p>0.05）；LIM组RPE细胞前部和后极部的HGF的阳性表达率都明显高于SC组的前部和后极部，且有显著性差异（p<0.05）。<br>　　 4逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）结果：LIM组与SC组RPE细胞HGFmRNA均有表达。LIM组与SC组各组自身前部及后极部HGFmRNA表达无显著性差异（p>0.05）；LIM组前部和后极部HGFmRNA表达明显高于SC组，且有显著性差异（p<0.05）。<br>　　 5激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）检测结果：LIM组与SC组RPE细胞均有钙荧光。LIM组前部及后极部钙离子的浓度明显高于SC组，且有显著性差异（p<0.05），而LIM组和SC组前部钙离子的浓度与后极部比较，差异无显著意义（p>0.05）。<br>　　 结论：凹透镜诱导可以引起明显的轴性近视；体外培养的豚鼠RPE细胞稳定表达HGF。LIM组RPE细胞中前部和后极部HGF及HGFmRNA的表达均明显高于SC组。说明透镜诱导豚鼠实验性近视眼RPE细胞中HGF无论在转录水平还是在蛋白表达上都增高，HGF在实验性近视眼RPE细胞中的活性升高，HGF通过间接方式参与实验性近视眼的形成。<br>　　 LIM组与SC组RPE细胞均显示较强的Ca2+荧光；LIM组前部及后极部RPE细胞胞浆内Ca2+荧光强度明显高于SC组。LIM组与SC组各自前部及后极部Ca2+荧光强度差别不大。表明透镜诱导豚鼠实验性近视眼球前部和后极部的RPE细胞中Ca2+浓度增高。Ca2+参与了豚鼠实验性近视眼的形成。