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脂联素对高糖中人视网膜色素上皮细胞活性、Caspase-3和T-cad表达的影响

摘要目的:观察脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮(hRPE)细胞活性、caspase-3与T-钙粘蛋白(T-cad)表达的影响,以探讨脂联素对糖尿病视网膜病变(DR)的作用。<br>   方法:①将人视网膜色素上皮细胞随机分为正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖组(33mmol/L葡萄糖)、脂联素组(33mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml脂联素),运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同情况下48小时后对人视网膜色素上皮细胞活性的影响。②再将上述各组细胞分别培养24小时,48小时,72小时后,运用荧光定量PCR法测定细胞内T-钙粘蛋白的表达水平,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中caspase-3的含量。<br>   结果:①高糖组的细胞活力明显低于正常对照组(P<0.05),而在脂联素干预后,细胞活力比高糖组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。②正常对照组未见caspase-3的明显表达;24h、48h及72h高糖组的caspase-3较正常对照组表达增加(P<0.01);而24h、48h及72h脂联素组的caspase-3较高糖组表达下降(P<0.01)。③24h、48h及72h高糖组较正常对照组的T-钙粘蛋白表达下调,而脂联素组较高糖组的T-钙粘蛋白表达上调,差异有统计学意义。<br>   结论:高糖对hRPE细胞具有毒性作用,它可明显降低hRPE细胞的活力,上调caspase-3的表达,从而损伤hRPE细胞的功能,并诱导其凋亡;另外,高糖还可通过下调T-钙粘蛋白的表达参与DR的发生和发展。脂联素可以促进hRPE的增殖,下调caspase-3的表达及上调T-钙粘蛋白的表达,提示脂联素与糖尿病视网膜病变的发生发展密切相关,并对高糖导致的hRPE细胞的损伤具有保护作用,并为临床应用脂联素治疗糖尿病视网膜病变提供了一定的理论依据。

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