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摘要目前，器官移植已经成为治疗各种脏器终末期疾病的唯一、有效治疗手段。许多患者通过移植同种异体器官获得新生。然而，外来器官进入机体后不可避免地会激发受者的免疫系统，产生针对移植器官的免疫应答以及排斥反应。多种新型免疫抑制剂的临床应用，虽然降低了移植排斥反应的发生率，但仍然存在两大问题：其一，免疫抑制剂并不能完全抑制排斥反应的发生；其二，长期应用免疫抑制剂存在诸多不良反应，包括药物的毒性、过度抑制机体免疫力造成的感染及新生肿瘤等。因此，抑制同种移植排斥反应并诱导机体对供者抗原的特异性免疫耐受，使机体保持正常的免疫力以抵抗微生物等病原体感染及肿瘤的发生，是解决器官移植排斥反应的最佳途径，也是移植领域研究的热点之一。<br>　　 树突状细胞(dendritic cells，DC)是一类功能强大，并且是唯一能够激活初始T细胞的抗原提呈细胞，在识别和提呈抗原、启动免疫应答、诱导移植排斥反应中起着重要的作用。然而，近年来的研究表明DC是一类异质性细胞群体，具有不同的亚群和不同的功能状态，不但在增强免疫反应上具有重要的作用，也具有抑制排斥反应、诱导特异性免疫耐受的潜力。有研究表明，未成熟DC缺乏共刺激分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达，体外能够诱导同种抗原特异性的T细胞失能。然而，体内未成熟DC存在着自然发育成熟的内在机制，同时，器官移植术后受者体内产生的多种介质，如致炎性细胞因子、LPS等，均能促进DC分化成熟，使之拥有强大的免疫原性。因此，某些体外调控手段，如免疫抑制分子1,25-二羟维生素D共培养或白细胞介素10(interleukin-10，IL-10)、转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)等基因修饰，可以使DC维持于稳定的不成熟状态，增强其耐受原性，是减轻移植排斥反应、诱导特异性免疫耐受的重要途径并具有潜在的临床应用价值。<br>　　 细胞因子信号抑制因子1(suppressor ofcytokine signaling1，SOCS1)作为负性调节细胞因子Janus激酶-信号传导和转录活化因子(Janus kinase-signal transducer andactivator of transcription,JAK-STAT)信号途径的蛋白而被发现，可以抑制γ干扰素(interferon-γ，IFN-γ)、IL-6、生长激素(growth hormone，GH)等细胞内信号传导。新的研究显示SOCS1对DC的成熟和功能具有重要的调控作用，源于SOCS1-/-小鼠的脾脏DC与正常DC相比，表达高水平共刺激分子，对IL-4、IFN-γ刺激呈明显高反应，刺激B细胞的增殖作用更加强烈。负载抗原的SOCS1-/-DC和正常DC分别注射到同一只小鼠不同足垫，前者能够激发小鼠足垫区域引流淋巴结更加强烈的Th1型反应，该淋巴结分离的T细胞能够产生更高水平的IFN-γ。SOCS1基因沉默的DC负载卵白蛋白(ovalbumin,OVA)后，体内、外均能更有效地刺激OVA特异性T细胞的增殖反应及细胞毒性作用。SOCS1基因沉默DC以及SOCS1-/-DC具有更强的免疫刺激功能以及打破自身耐受的能力。鉴于SOCS1基因对DC发育及免疫功能的重要调控作用，我们设想采用基因转染技术体外增加未成熟DC内SOCS1基因的表达将会减缓或阻止DC的成熟过程，体内回输有利于减轻排斥反应，并可能诱导稳定、有效的供者特异性免疫耐受。<br>　　 本文通过体外培养、扩增并富集小鼠骨髓来源的DC，并借助复制缺陷型腺病毒载体将SOCS1基因转入DC，研究SOCS1基因修饰的未成熟DC的表型及功能的变化以及体外诱导同种抗原特异性T细胞低反应性的作用和效果；通过建立小鼠同种异体异位心脏移植模型，观察SOCS1基因修饰的未成熟DC体内减轻排斥反应、诱导心脏移植免疫耐受的效果，并探讨了可能的机制。<br>　　 第一部分小鼠骨髓树突状细胞体外培养及SOCS1基因转染。<br>　　 第二部分SOCS1基因修饰的树突状细胞的表型特征及体外免疫学功能分析。<br>　　 第三部分 SOCS1基因修饰的树突状细胞治疗同种移植排斥的效果和免疫学机制。<br>　　 结论：重组复制缺欠型腺病毒载体介导的SOCS1基因转染可以明显增加DC内SOCS1表达，且病毒载体本身在转染过程中对DC的影响较小。即使存在外源性刺激物时，SOCS1基因修饰的未成熟DC仍然能够稳定于未成熟状态，表达低水平的MHC分子和共刺激分子，分泌高水平的免疫抑制性细胞因子IL-10，拥有较强抗原吞噬功能，较弱的抗原刺激能力，体外能够诱导同种T细胞抗原特异性低反应性。体内免疫SOCS1基因修饰的未成熟DC，能够抑制同种排斥反应，延长同种移植物存活期，抑制受体淋巴细胞的抗原反应性及CTL杀伤活性，诱导CD4+CD25+Treg的产生并促进Foxp3的表达，在一定程度上诱导受者形成免疫耐受。因此，进一步研究基于SOCS1基因修饰的DC的免疫治疗策略对于诱导移植免疫耐受有重要意义，具有潜在的临床应用价值。