抗癌活性肽对人乳腺癌细胞MCF-7GADD45A基因甲基化的影响-论文-万方医学网

抗癌活性肽对人乳腺癌细胞MCF-7GADD45A基因甲基化的影响

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摘要目的：探讨抗癌活性肽对人乳腺癌细胞MCF-7的作用,以及抗癌活性肽是否通过GADD45A基因甲基化影响细胞凋亡。<br>　　方法：体外培养人MCF-7细胞,实验分为ACBP实验组及对照组,ACBP组分为六个浓度包括5,10,15,20,25,30μg/ml,采用MTT比色法检测抗癌活性肽对人MCF-7细胞生长增殖的抑制作用；细胞形态学,荧光染色检测凋亡细胞形态；流式细胞方面检测早期凋亡；免疫组化,ms-PCR检测GADD45A表达的变化。<br>　　结果:1)ACBP-L对MCF-7细胞具有生长增殖抑制作用,并具有时间效应依赖性和剂量效应依赖性,ACBP-NL(正常肝肽肽)组内(不同时间段)(F=290.32；P<0.01),组间(不同浓度)(F=467.0；P<0.01)；ACBP-L(诱导肝肽)组内(不同时间段)比较差异有显著性(F=321.64；P<0.01),组间(不同浓度)比较差异有显著性(F=573.62；P<0.01)；紫杉醇组内(不同时间段)比较无差异,(F=9.32；P>0.05),组间(不同浓度)比较差异有显著性(F=467.0；P<0.01)。2)。倒置相差显微镜和细胞HE染色观察凋亡细胞形态学变化,显示典型的凋亡细胞特征；琼脂糖凝胶电泳观测细胞基因组DNA的降解情况,可见ACBP处理组出现DNALadder；流式细胞术检测早期细胞凋亡,两组间凋亡率分别为阴性对照组凋亡率为0.743+0.195,ACBP-NL组24.60+5.83,ACBP-L组29.33+1.04,P>0.05正常肽组和诱导肽组细胞凋亡率差异无统计学意义；3)各实验组GADD45A基因未发生甲基化。