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血管钠肽预防碾压撕脱皮瓣继发坏死的机制研究

摘要背景:皮肤撕脱伤是整形外科常见的创伤之一,撕脱组织在早期往往有血液循环并保持一定的活力但术后逐渐发生组织栓塞坏死,防治撕脱皮瓣的继发坏死已成为该领域的主要难点。近期研究显示血管钠肽有可能拮抗撕脱皮瓣继发坏死病理生理机制中绝大部分的损伤因素,本实验探讨血管钠肽是否可以预防碾压撕脱皮瓣的继发坏死以及其可能的机制,以期为临床提供一个效果显著的治疗手段。<br>   方法:39只8周龄SD大鼠随机分成3组(每组n=13)。用西京医院整形外科研究所研制的小型化皮肤撕脱伤模型机,将各只大鼠背部掀起的3cm×9cm任意皮瓣进行碾压撕脱(压力2.0~2.5kg重复三次)制作碾压撕脱皮瓣模型。组A:给予生理盐水1ml/kg腹腔注射(阴性对照),组B:给予血管钠肽0.1mg/kg静脉注射,组C:给予地塞米松5mg/kg腹腔注射(阳性对照),各组分别在术后2h、1d、2d、3d给药;在术后12h、1d、2d、3d采集血清。术后7d观察各组皮瓣成活面积。各组收集的血清用于研究血管钠肽的作用机制:在Transwell双层细胞培养小室的半透膜上培养脐静脉内皮细胞,待细胞长成单层融合状态,分别用各组大鼠血清孵育刺激后,用罗丹明标记的右旋糖酐(荧光大分子物质)检测血管钠肽对内皮细胞通透性的影响;培养的内皮细胞经各组大鼠血清孵育刺激后TUNEL法检测血管钠肽对内皮细胞凋亡的影响;将各组大鼠血清作为诱导剂与正常大鼠静脉血混合后,血小板聚集仪检测血管钠肽对全血血小板聚集的影响;正常大鼠的血小板、白细胞分离后分别用CFSE和DiD荧光标记,混合后用各组大鼠血清刺激,行流式细胞仪分析,检测血管钠肽对白细胞-血小板黏附的影响。<br>   结果:各组皮瓣存活面积:组A37.42±+4.36%,组B49.96±2.32%,组C43.16±4.13%;各组内皮细胞通透性改变:组A6.65±0.09ug/ml,组B5.50±0.11ug/ml,组C5.95±0.09ug/ml;各组内皮细胞凋亡的改变:组A40.34±0.13,组B18.63±0.23,组C22.03±0.16;各组血小板聚集的改变:time=12h组A10.5±0.58ohm,组B6.25±+0.50ohm,组C7.75±0.50ohm;time=1d组A17.75±0.50ohm,组B9.75±0.50ohm,组C14.0±0ohm;time=2d组A24.0±1.15ohm,组B11.75±0.50ohm,组C15.75±0.50ohm;time=3d组A33.5±1.73ohm,组B16.5±0.57ohm,组C21.75±0.50ohm;各组白细胞-血小板黏附的改变:组A28.26±0.56%,组B14.38±0.35%,组C27.01±0.34%;各组间均有统计学差异(P<0.05)。<br>   结论:血管钠肽可以预防碾压撕脱皮瓣的继发坏死,其是通过降低内皮细胞的通透性、减少内皮细胞的凋亡、降低血小板的聚集、白细胞-血小板的黏附,减少血栓的形成等多方面来实现的。

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导师 熊猛
分类号 R622.1
发布时间 2010-12-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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