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摘要目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone mescnchymal stem cells,BMSCs)移植对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病大鼠足细胞足突的修复作用及其对裂孔隔膜分子Nephrin表达的影响,为BMSCs移植治疗肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)提供实验依据。<br>　　 方法:全骨髓贴壁筛选法体外分离、培养、扩增大鼠BMSCs,流式细胞仪鉴定BMSCs表面抗原,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodcoxyuridine,Brdu)对细胞进行标记;6周龄健康雄性SD大鼠45只随机分为3组,每组15只。模型组:一次性腹腔注射嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)造模,按15mg/100g注射,于造模即日通过腹主动脉近肾动脉处注射1ml生理盐水治疗;BMSCs组:PAN(15mg/100g)造模,于造模即日通过腹主动脉近肾动脉处注射1ml BMSCs治疗(细胞移植前经Brdu标记示踪),剂量为每只大鼠约1×106/ml;对照组:不予以造模。实验第10d杀鼠,留取24h尿检测尿蛋白水平;血标本检测血清白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)等生化指标;电镜下观察肾组织足细胞足突改变;免疫组化法检测Brdu标记的细胞在肾组织中的表达;半定量RT-PCR及Western-blot法检测Nephrin mRNA及蛋白的表达变化。<br>　　 结果:<br>　　 ①原代分离培养的BMSCs特异性好,流式细胞仪鉴定CD90表达阳性、CD45表达阴性。<br>　　 ②实验第10d,模型组大鼠出现大量蛋白尿、血白蛋白降低、胆固醇升高。与模型组比较,BMSCs组尿蛋白、血胆固醇降低,血白蛋白回升,差异有统计学意义(P＜0.05)。各组间血尿素氮、肌酐值无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05)。<br>　　 ③电镜下,对照组足细胞足突结构清晰、无融合现象,模型组足细胞足突广泛融合、变平,而BMSCs组足突部分融合。<br>　　 ④免疫组化结果显示经Brdu标记的BMSCs在肾小球及肾小管聚集。<br>　　 ⑤半定量RT-PCR结果表明,模型组Ncphrin mRNA相对表达量较对照组明显下降,BMSCs组与模型组比较有所增加,差异有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　 ⑥Wester-blot结果表明,模型组Nephrin蛋白的相对表达量较对照组明显下降,BMSCs组与模型组比较有所增加,差异有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　 结论:BMSCs移植能增加PAN肾病大鼠足细胞足突Ncphrin的表达;BMSCs移植对PAN肾病大鼠足突融合有一定的改善,Ncphrin表达的增加可能在其中发挥了一定的作用。