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根癌农杆菌LNUB335合成辅酶Q10发酵条件研究

摘要辅酶Q10(CoenzymeQ10,CoQ10)又称癸烯醌、泛醌,属于脂溶性维生素,广泛存在于动物、植物和微生物细胞内,其主要生理功能是参与线粒体的能量代谢和抗氧化作用。<br>   迄今为止,国内外报道的辅酶Q10生产菌株主要为细菌,其次是酵母菌,另外还有霉菌等。为了提高辅酶Q10的产量,本文以根癌农杆菌LNUB335为出发菌株,应用单因素和正交分析方法对根癌农杆菌的培养基进行了系统研究,得到了优化的培养基组成,优化培养基为:葡萄糖35g/L、蔗糖17.5g/L、酵母膏12.5g/L、蛋白胨4g/L、(NH4)2SO46g/L、KH2PO40.5g/L、K2HPO40.5g/L、MgSO4·7H2O0.25g/L。此时辅酶Q10的产量由优化前的1.92mg/L提高到5.27mg/L。<br>   为了进一步提高辅酶Q10的产量以及简化其提取工艺,本文通过对辅酶Q10代谢途径分析的基础上,研究添加前体物质(茄尼醇)对辅酶Q10合成的影响。同时,由于辅酶Q10是胞内产物,必须将细胞破壁,使之得以释放,才能进一步通过有机溶剂提取。因此,最终确立的实验方法及结果是:茄尼醇的添加浓度为终浓度0.7g/L,添加时间为84h,转化时间为12h,在有机溶剂氯仿超声破壁条件下提取,紫外检测到的辅酶Q10产量达到15.43mg/L。<br>   辅酶Q10与维生素E具有协同作用,本文对其体外抗氧化活性进行了初探。结果表明,辅酶Q10具有较好的超氧阴离子清除能力,弱的羟基自由基清除能力。<br>   综上所述,本研究以根癌农杆菌LNUB335为出发菌株发酵生产辅酶Q10。通过对提取工艺、发酵条件以及前体物质茄尼醇添加的研究来提高辅酶Q10的产量,为进一步扩大辅酶Q10的生产规模提供基础理论和实验指导。

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