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细胞工厂在甲肝病毒规模化生产中的应用研究

摘要甲型肝炎是世界范围流行的传染病,给人民的健康和国家的经济造成很大的损失。甲型肝炎的病原体甲肝病毒(Hepatitis AVirus HAV),主要是由粪-口传播的。由于卫生条件的差异,或某些特殊媒介(如贝壳类食物等)的传播,常引起甲型肝炎的暴发和流行,甚至大流行。甲型肝炎的流行因素复杂,常常防不胜防,所以采用疫苗免疫预防是控制甲肝流行的最主要手段。甲肝病毒只有一个血清型,从某一地区分离的HAV制备的疫苗,可用于不同地区的甲肝预防。目前已有多株甲肝病毒毒种用于疫苗的生产。2008年甲肝疫苗纳入国家计划免疫后,市场需求量增大,在现有厂房设施条件下摸索更能集约化生产的方法势在必行。<br>   本文的目的:用细胞工厂培养KMB17细胞及甲肝病毒吕8株制备甲肝疫苗,在有限的单位空间内提高产能,降低疫苗生产成本。<br>   方法:用细胞工厂培养KMB17细胞,连续不断的进行传代,直至其生命终结,观察KMB17细胞在细胞工厂上的生长特性与研发时在转瓶上培养的是否一致;其中一部分细胞在传代至32代时接种甲肝吕8株病毒,观察该病毒株能否在细胞工厂上通过KMB17细胞进行增殖,达到生产疫苗的要求,同时在病毒感染细胞后0天、7天、11天、15天、17天、19天、21天、23天、25天、27天和29天时收获病毒,找出该病毒增殖高峰出现的培养时间,对该病毒增殖动力学进行研究。<br>   结果:KMB17细胞能够在细胞工厂上生长,并且没有改变其生物学特性,甲肝病毒吕8株在KMB17细胞中增殖良好,收获的病毒收获液获得良好的抗原滴度,能够满足甲肝疫苗生产需要,且在培养21-23天时病毒增殖达到高峰,与传统的转瓶培养方式一致。使用细胞工厂培养甲肝病毒不仅病毒含量得到提高,而且在单位空间内扩大了培养面积,在现有厂房设施的条件下扩大了产能,降低生产成本,因而用细胞工厂培养甲肝病毒吕8株生产疫苗是可行的,是更利于集约化生产的培养方式。

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