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FRK对人脑胶质瘤细胞增殖和凋亡作用的研究

摘要目的:研究FRK在脑胶质瘤中的表达情况;探讨FRK(Fyn related kinase)对胶质瘤U251、U87细胞增殖和凋亡的影响,从而为胶质瘤的治疗提供新的靶点。<br>   方法:1、采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测FRK在非肿瘤脑组织及脑胶质瘤组织中的表达情况。2、通过Lipofectamine2000将pcDNA3.0-FRK质粒转染到胶质瘤U251、U87细胞中。实验分为空载体对照组(转染pcDNA3.1)和FRK过表达组(转染pcDNA3.0-FRK)。3、运用细胞免疫荧光、RT-PCR、蛋白免疫印迹等方法鉴定外源性的FRK在细胞中的表达情况。4、分别以CCK-8法和流式细胞术检测FRK对细胞增殖及凋亡的影响。<br>   结果:1、RT-PCR结果显示,与非肿瘤脑组织相比,FRK在胶质瘤组织中呈低表达(P<0.01)。<br>   2、细胞免疫荧光检测显示,转染细胞48h,FRK转染率达到70%左右;与空载体对照组相比,过表达组细胞FRK mRNA水平和蛋白表达均上调。<br>   3、CCK-8法结果显示:FRK过表达组与空载体对照组相比,其细胞增殖率降低(P<0.01)。<br>   4、流式细胞术检测结果显示:FRK过表达组较空载体对照组细胞凋亡率增加(P<0.01)。<br>   结论:1、人脑胶质瘤组织中FRK基因表达量较非肿瘤脑组织减低。2、过表达FRK可以抑制脑胶质瘤U251、U87细胞的增殖、促进其凋亡。

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