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摘要1.孕酮对小鼠胚胎干细胞增殖作用影响的研究<br>　　 2.ES分化过程中mvh剪切体的研究<br>　　 第一部分:胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES)具有自我更新和多项分化的潜能。研究表明雌激素促进小鼠胚胎干细胞的增值。为了探讨孕酮对小鼠胚胎干细胞(mES)的影响,分别采用细胞增殖试验(MTT法),克隆形成试验检测了孕酮对于胚胎干细胞的影响,结果显示孕酮有促进细胞增殖的作用和促进单个胚胎干细胞存活的能力。细胞周期检测进一步证实加入孕酮后,和对照组相比,胚胎干细胞处在分裂期的细胞比例增多,处在S期和G2+M期的细胞比例增多。说明孕酮促进了ES细胞的DNA合成,细胞分裂速度加快,为了检测加入孕酮后对胚胎干细胞多能性的影响,Western blot结果显示加入孕酮后胚胎干细胞的关键转录因子Oct-4的表达变化不大,说明细胞仍然处在干细胞的未分化状态。细胞增殖和调控细胞周期的因子有关,Real-time PCR检测了和细胞周期有关cyclin,CDK以及一些原癌基因c-myc,c-jun,c-fos.发现部分表达上调,孕酮促生长的作用可能和这些因子的表达水平升高有关。结论:孕酮有促进ES细胞增殖和存活的作用。<br>　　 第二部分:在EB分化过程中,生殖细胞特异的基因mvh(mouse vasa homologue)会表达。Mvh调节靶mRNA的翻译,这些mRNA编码一些生殖细胞特异的蛋白。Mvh在细胞RNA代谢中具有重要作用,参与RNA代谢的几乎所有过程,包括转录调控、mRNA前体的剪接、核糖体组装、核内mRNA的运输、翻译起始调控等等。目前genebank中报道的mvh的成熟mRNA的序列有两个。登录号分别为:NM_001145885.1,NM_010029.2。在克隆mvh基因的过程中,发现第三种剪接体的存在。并且第三种剪接体在正常的小鼠睾丸组织中也存在,我们的研究结果显示mvh作为生殖系高度特异和保守的蛋白,其RNA的剪切过程具有可变性。即可以剪切出不同长度的成熟mRNA。