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大鼠肝再生期间与血管新生相关的窦状隙表面差异质膜蛋白质组学初步研究

摘要研究背景:肝脏再生过程是一个多步骤、多因子、涉及到多种信号的精确而有序的复杂过程,而血管形成是所有器官包括肝脏再生的基本条件。肝窦是特化的毛细血管网,肝再生过程中,肝血窦的重构涉及到血管内皮细胞及其它细胞的分裂增殖。内皮细胞的增殖、迁移、粘着、排列以至最后形成完整的肝血窦必定涉及到肝窦内皮细胞质膜蛋白质的变化。从膜蛋白的角度入手,检测和鉴定与肝脏再生和血管形成相关的蛋白,对揭示肝再生的机制是一个有益的尝试。<br>   研究目的:运用蛋白质组学的方法观察肝脏再生过程中肝窦内皮细胞质膜蛋白质组学的动态变化。对那些在肝脏再生过程中发生变化的蛋白质进行鉴定,以期寻找在肝血窦重构时内皮细胞表面差异表达的质膜蛋白质,为进一步研究肝脏再生机制奠定基础。<br>   研究方法:以肝大部切除术制备大鼠肝脏再生模型。术后3天后对肝大部切除术组和假手术组的大鼠肝脏进行活体硅胶灌注,分离质膜。提取质膜蛋白进行16-BAC/SDS-PAGE电泳系统分离,将差异表达蛋白点进行胶内消化,HCT质谱仪鉴定,数据库搜索确定差异蛋白的性质。<br>   研究结果:高倍电镜分析表明硅胶分离肝窦状隙内皮细胞质膜是有效的。而质谱鉴定的结果也显示16BAC/SDS-PAGE电泳系统分离膜蛋白质的成功。经质谱鉴定发现11个表达上调的蛋白,8个下调的蛋白。这些蛋白质的上调或下调响应了肝窦状隙中正在发生的变化。<br>   结论:有多个内皮细胞膜蛋白或与膜相关的蛋白响应了肝窦状隙的重构。差异蛋白质组学是揭示复杂生理过程机制的有效方法。

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