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摘要背景：再灌注损伤(Reperfusion injury，RI)是急性心肌梗塞与缺血性中风等众多心血管疾病病理损害的主要机制。在缺血后再灌注的头几分钟，细胞内钙离子浓度升高，氧化自由基大量生成和无机磷离子浓度增加，促使线粒体内膜上形成大量非特异性的通透转换孔(Mitochondrial permeability transition pore，mPTP)，使线粒体内膜丧失屏障作用，大量溶质分子进入线粒体，导致线粒体氧化磷酸化脱偶联、基质肿胀、膜电位下降和线粒体崩解，当受累的线粒体数量与程度达到一定阈值，便会发生细胞死亡。尽管有大量关于mPTP的研究，究竟mPTP的分子身份是什么，到目前为止还不清楚。当前研究发现同属于线粒体溶质转运体家族(Solute carriers，SLCs)的磷转运体(Phosphate carrier，PiC)和腺嘌呤核苷酸转运体(ADP/ATP translocase，ANT)可能参与了mPTP的形成。利用序列比对结合种系发生分析，发现线粒体溶质转运体家族成员中存在序列及结构相似较高成员谷氨酸-天冬氨酸转运体(Aspartate/glutamatecarriers，AGC)和ATP-Mg/Pi转运体(ATP-Mg/Pi carriers)，推测其可能参与了mPTP的形成和开放。<br>　　 目的：阐明mPTP的分子身份；揭示mPTP各成员在细胞死亡的作用。<br>　　 方法：利用RT-PCR技术检测SLCs成员的表达亚型并作为研究对象，进一步通过RNAi干扰技术对初步筛选的线粒体溶质运载体家族的PiC、ANT、AGC与ATP-Mg/Pi转运体进行了逐一和联合干扰，用1.8mM/L钙离子和5μMIonomycin刺激1小时后，Western-blotting检测细胞色素c释放。采用同样的干扰和刺激方法检测细胞死亡数目的变化，进一步用TMRM检测线粒体膜电位的变化。<br>　　 结果：RNAi干扰H9c2细胞系和新生大鼠心肌细胞中的PiC、ANT2和ATP-Mg/Pi均能显著降低高钙诱导的细胞色素c的释放，而RNAi干扰ANT1和AGC后细胞色素c的释放量同对照组相比没有明显变化。同样，RNAi干扰H9c2细胞系和新生大鼠心肌细胞中的PiC、ANT2和ATP-Mg/Pi后，可以显著降低高钙诱导的细胞死亡，而且H9c2细胞系模拟缺血再灌注的实验结果表明，干扰上述SLC25A家族成员，可使线粒体膜电位保持较高水平。<br>　　 结论：PiC、ANT2和ATP-Mg/Pi均参与了高钙诱导的mPTP的形成和开放，RNAi干扰这些成员会降低细胞死亡数目。为进一步阐明mPTP的分子身份，寻找新药靶点提供了理论基础。<br>