摘要内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分,在进入人或动物的血液系统后,即使在很低的浓度下也会表现出很强的生物效应。所以去除医药制品和血液及体液中的内毒素有非常重要的意义。<br> 亲和吸附是一种常用的蛋白质分离技术,具有回收率和活性高的优点,同时,因其对内毒素优良的特异选择性已成为近年来内毒素脱除的研究热点。而亲和膜作为亲和膜色谱的一种,相比较传统的色谱填充柱拥有处理量大和便于放大的优点,更适合于实际应用。<br> 基于此,本文首先分别以L-丝氨酸(Ser),L-精氨酸(Arg)和L-天冬酰胺(Asn)单体分子作为配基,以聚偏氟乙烯(PVDF)为基膜,1,6-己二胺为间隔臂制备亲和膜,用于人血浆中内毒素的脱除。对三种亲和膜的内毒素脱除能力进行比较发现PVDF-Ser亲和膜拥有最好的脱除效果。自制的PVDF-Ser亲和膜组件在1ml/min的流速下,对40ml人血浆样品(内毒素含量为0.42EU/ml)的清除率为48.3%,亲和膜对内毒素的吸附能力为0.027EU/cm2;同时亲和膜对人血浆样品的其它生化指标的影响不大,总蛋白(包括各种酶)的损失率为14.9%,白蛋白恢复率为92.6%。<br> 为了深入考察PVDF-Ser亲和膜的结构与性质,文章采用FTIR,XPS和SEM等对PVDF-Ser膜进行了表征;探讨了离子强度、pH,流速等对亲和膜吸附内毒素能力的影响,研究了内毒素分子在亲和膜上的吸附动力学。<br> 放大后的PVDF-Ser亲和膜组件用于动物实验结果表明,PVDF-Ser亲和膜具有较为理想的血液相容性,不会对血液系统造成毒害作用;亲和膜组件对家猪血液内内毒素的脱除是有效的,可以很好的降低肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)的浓度,从而抑制炎症反应的发生。
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