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摘要[目的]<br>　　 应用RNAi技术靶向封闭人肝癌HepG2细胞的PEG10基因，观察PEG10基因表达下调对Wnt/β-catenin信号通路的关键因子β-catenin和Wnt1基因表达水平的影响，及对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响，探讨PEG10基因对Wnt/β-catenin信号通路的影响在人肝癌发病机制中的作用，为肝癌的基因治疗提供新思路。<br>　　 [方法]<br>　　 应用脂质体转染技术将靶向PEG10的短发夹状RNA(short hairpin RNA，shRNA)转染HepG2细胞，利用半定量RT-PCR和免疫组化法分别检测PEG10、β-catenin和Wnt1基因mRNA及蛋白表达水平；同时应用MTT比色试验检测细胞增殖及应用流式细胞仪检测细胞凋亡。<br>　　 [结果]<br>　　 1.转染PEG10特异的shRNA能明显抑制HepG2细胞中PEG10基因mRNA及蛋白的表达，与未转染对照组比较，其抑制率分别为65.6％、60.5％。<br>　　 2.成功下调PEG10基因表达后，HepG2细胞中β-catenin和Wnt1 mRNA及蛋白的表达均随之明显下调，与未转染对照组比较，其mRNA水平抑制率分别为52.5％、96.1％，其蛋白水平抑制率分别为89.1％、78.6％。<br>　　 3.转染PEG10-shRNA(10nM)24小时后对HepG2细胞增殖和凋亡均无明显影响(P>0.05)。<br>　　 [结论]<br>　　 1.PEG10基因对肝癌的促进作用可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。<br>　　 2.抑制PEG10基因的表达对HepG2细胞增殖和凋亡均无明显影响，但由于本实验仅检测了转染PEG10-shRNA后24小时的HepG2细胞增殖和凋亡，观察时间点设置不合理，故实验结果可靠性不大。