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摘要[目的]<br>　　 观察甘氨鹅脱氧胆酸盐(glycochenodeoxcholate,GCDC)对人正常肝细胞HL-7702凋亡诱导作用,探讨GCDC诱导HL-7702细胞凋亡的机制。<br>　　 [方法]<br>　　 终浓度分别为50μmol/L、100μmol/L、150μmol/L、200μmol/L、250μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞4h、8h、12h、24h,光学显微镜、SunBioTMAm-Blue细胞增殖与活性检测和乳酸脱氢酶活性的测定观测GCDC对HL-7702细胞凋亡的影响,AnnexinV-FITC/PI双染色法检测GCDC诱导HL-7702细胞凋亡的凋亡率,用荧光指示剂Fluo-3/AM测定HL-7702细胞内钙离子浓度。<br>　　 [结果]<br>　　 (1)终浓度为150μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24h后,细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变,包括核固缩、核碎裂和凋亡小体形成等。<br>　　 (2)SunBioTM Am-Blue吸光光度法检测终浓度分别为50、100、150、200、250μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24h后,以及终浓度为150μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞2h、4h、8h、12h后,结果显示不同浓度的GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡,且呈剂量与时间的依赖性。<br>　　 (3)GENMED乳酸脱氢酶(LDH)总活性比色法定量检测受损肝细胞结果显示50、100、150、200、250μmol/L的的GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡,呈剂量依赖性。<br>　　 (4)AnnexinV-FITC/PI双染色法检测结果显示,50、100、150、200、250μmol/的GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡,呈剂量依赖性,凋亡率分别为(8.26±2.6)％(t=4.08),(11.76±2.9)%(t=6.01),(25.3±3.O)%(t=11.22),(27.0±2.7)%(t=19.11),45.02±3.5%(t=28.89),较对照组(2.5±0.5)%升高显著(P＜0.05)。<br>　　 (5)GCDC能使HL-7702细胞内钙离子浓度增加,且具有浓度和时间依赖性.<br>　　 [结论]<br>　　 1、GCDC诱导人正常肝细胞HL-7702凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性。<br>　　 2、GCDC可通过增加HL-7702细胞内钙离子浓度而导致细胞凋亡。<br>　　 3、本实验初步探讨了GCDC诱导人正常肝细胞凋亡及其凋亡机制,为临床治疗胆汁淤积性肝病提供思路。