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摘要目的：<br>　　 观察柴胡皂苷d(saikosaponin-d,SSd)对阻塞性黄疸大鼠肝组织保护作用及胆汁酸代谢的影响,观察阻黄大鼠肝组织中基质交联分子1(stromal interactionmolecule l,STIM1)基因、蛋白表达以及肝细胞内钙离子浓度的变化,观察SSd对阻黄大鼠肝组织中STIM1基因、蛋白表达以及肝细胞钙离子浓度的影响,进一步研究SSd对STIM1表达和肝细胞钙离子代谢的调控机制。<br>　　 方法：<br>　　 将108只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术对照+生理盐水组(SO+NS)、胆总管结扎+生理盐水组(BDL+NS)、胆总管结扎+牛磺熊去氧胆酸组(BDL+TUDCA)、胆总管结扎+高、中、低剂量柴胡皂苷d组(BDL+High/Medium/Low-dose SSd),同时各组随机分7、14、21天三个时段组,每时段每组6只。SO+NS组和BDL+NS组每天腹腔注射生理盐水;BDL+TUDCA组每天按20mg,kg剂量予以腹腔注射;BDL+SSd组分别每天按1.0mg/kg、1.5mg/kg、2.0mg/kg剂量腹腔注射,分别连续给药7天、14天、2l天,于各时段末处死该时段组大鼠,剖腹取肝组织和血液标本,用光学显微镜观察大鼠肝组织病理变化;检测血液生化指标TBA、TB、DB、ALT;应用流式细胞仪通过荧光指示剂Fluo-3/AM测定肝细胞内钙离子浓度;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测STIMl的mRNA表达;免疫组化法检测肝组织中STIM1表达,用美国Image Pro Plus专业图像分析软件对其进行分析。<br>　　 结果：<br>　　 1、光学显微镜下,HE染色结果显示,SO+NS组各时间段肝小叶结构、肝细胞形态正常,肝窦无扩张充血,中央静脉及汇管区无明显异常;7天末BDL+NS组肝细胞出现点状坏死,汇管区或中心静脉区可见少量纤维增生;BDL+TUDCA及BDL+SSd组除个别标本肝细胞出现轻微坏死,无明显变化;14天末BDL+NS组肝小叶开始出现多个坏死灶,肝细胞坏死脱失,周围伴炎性细胞浸润,窦周纤维化出现,汇管区和中心静脉区纤维间隔明显增生;BDL+TUCA组与BDL+SSd组坏死、增生程度较为减轻,且中、高剂量明显减轻:21天末BDL+NS组肝细胞坏死、周围组织增生更加明显:BDL+nJDCA组及低剂量SSd组病理改变与BDL+NS组相比较轻,中、高剂量SSd组与BDL+NS组比较坏死纤维化程度明显减轻,纤维间隔较薄,炎性浸润较少。<br>　　 2、TBA、TB、DB、AUT测定结果:SO+NS组各时间段无明显变化;BDL+NS组7天、14天、21天各时相点各值明显增高:BDL+TUDCA组与BDL+SSd组在各时相点各值也出现不同程度升高,但较同时间段BDL+NS组明显减低(P＜0.05),其中中、高剂量SSd组显著降低(P＜0.01)。<br>　　 3、流式细胞仪结合荧光指示剂Fluo-3/AM检测肝细胞内钙离子浓度:与SO+NS组比较,BDL+NS组、BDL+TUDCA组、BDL+SSd组均可引起细胞内平均荧光强度(MFI)不同程度增高;与BDL+NS组比较,TUDCA组及各浓度SSd组MFI值明显降低(P＜0.05),中、高浓度SSd组下降显著(P＜0.01):与阳性对照治疗组(BDL+TUDCA)比较,中、高浓度SSd组钙离子水平明显低于阳性对照组(P＜0.05)。<br>　　 4、半定量RT-PCR检测STIMl基因mRNA表达:与SO组两两对比,7天末BDL组与SO组无明显差异(P＞0.05),14、21天末则明显低于SO组(P＜0.05);21天末TUDCA组、SSd低浓度组与SO组无明显差异(P＞0.05),其他时间段药物组STIM1表达明显增强(P＜0.05),中、高浓度SSd组显著增强(P＜0.01);BDL+NS组各时段组表达随时间减弱,两两比较差异明显(P＜0.05);TUDCA组表达与低浓度SSd组无明显差异(P＞0.05),低于中、高浓度SSd组,两两比较差异明显(P＜0.05);高浓度SSd组差异显著(P＜0.01)。<br>　　 5、免疫组化法检测STIMI在肝细胞内表达情况:SO+NS组在不同时间段肝组织显示为少量表达STIM1:BDL+NS组肝组织STIMI蛋白微弱或不表达;与SO组相比,BDL+TUDCA组及SSd各浓度组肝组织均有显著的STIM1表达(P＜0.01),主要见于细胞质内质网;同时间段TUDCA组表达强于低浓度SSd组,低于中、高浓度SSd组,两两比较差异明显(P＜0.05),高浓度SSd组差异显著(P＜0.01)。<br>　　 结论：<br>　　 1、SSd能明显减轻阻塞性黄疸大鼠的胆汁淤积,降低转氨酶水平,一定程度上缓解黄疸造成的肝功能异常,减轻肝损伤。<br>　　 2、胆汁淤积抑制STIM1 mRNA及蛋白表达,破坏肝细胞内钙离子平衡,引起正常肝细胞钙超载,其影响程度随时间逐渐加重。<br>　　 3、SSd能.卜调STIM1 mRNA及蛋白表达,呈浓度依赖性:减轻肝细胞钙超载程度,维持钙离子平衡,从而防止淤胆引起的钙超载,保护阻塞性黄疸大鼠肝脏功能。<br>