摘要目的:<br> 细胞增殖失控、分化成熟受阻、正常的凋亡程序失调、导致异常分化细胞大量增殖是白血病细胞疾病的生物学特点。因此白血病的有效治疗方法就是抑制细胞增殖、诱导异常分化的细胞向成熟或者较成熟细胞方向分化。人参是祖国传统医学的“补血”要药,人参总皂苷(total saponins of panax ginseng,TSPG)是其主要药理成分。目前从人参中提取的人参皂苷单体有30多种,其药理效应和作用机制不尽相同。人参皂苷Re(gensingnoside Re)是人参皂苷的一类主要有效成分,质量分数约占人参总皂苷的30%,目前人参皂苷Re对白血病细胞的分化诱导作用尚未见报道。本课题以慢性粒细胞白血病细胞株K562为研究对象,观察不同浓度TSPG和Re作用后,K562细胞的增殖和分化情况,探讨TSPG和Re对白血病的作用,为更深入的机制研究奠定基础。<br> 方法:<br> 1.以慢性粒细胞白血病细胞株K562为研究对象,观察不同浓度TSPG对K562细胞不同作用时间点的增殖抑制情况:采用MTT噻唑蓝比色试验测定不同浓度TSPG作用K562细胞不同时间点的抑制率;台盼蓝拒染活细胞计数不同浓度TSPG作用K562细胞不同时间点的细胞存活率。<br> 2.观察不同浓度TSPG和Re诱导K562向红系细胞分化情况:测定不同浓度TSPG和Re作用K562细胞48小时和/或者72小时后,K562细胞平均血红蛋白含量。不同浓度TSPG和Re作用K562细胞不同时间后计数其联苯胺染色阳性率。<br> 3.流式细胞术检测细胞表面标志物和凋亡率:400 mg/L的TSPG作用K562细胞48小时后检测其凋亡率。90μmol/L的Re作用K562细胞24h,48h,72h后检测细胞表面CD13、CD15、GPA。<br> 结果:<br> 1.TSPG对K562细胞的影响:MTT和台盼蓝计数显示TSPG浓度在200 mg/L-800 mg/L范围内对K562细胞增殖有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。联苯胺染色提示不同浓度TSPG作用K562细胞的阳性率与对照组比较无明显差异;血红蛋白测定结果显示不同浓度TSPG作用。K562细胞的血红蛋白含量与对照组相比有显著差异(P<0.05),但不同浓度TSPG组间并无差异。流式细胞术检测结果显示TSPG400mg/L组细胞凋亡率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。<br> 2.Re对K562细胞的影响:人参皂苷Re90μmol/L可以诱导K562细胞向早期红系细胞分化,表现为:K562细胞形态学上可见细胞体积缩小,核直径减小,胞浆丰富,核浆比例降低;Re在体外对K562细胞有诱导血红蛋白生成的作用;细胞膜表面CD13阳性率增加。<br> 结论:<br> 1.TSPG浓度在200 mg/L-800 mg/L范围内对K562细胞增殖有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。TSPG可诱导K562细胞分化。TSPG对K562细胞的增殖抑制作用可能与诱导K562细胞凋亡有关。<br> 2.人参皂苷Re90μmol/L能够在体外促进K562细胞血红蛋白的合成增加,使K562细胞膜表面CD13阳性率增加。人参皂苷Re90μmol/L可以诱导K562细胞向早期红系细胞分化。
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