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摘要目的:<br>　　 Proliferin related protein(PRP)最初被认为是小鼠胎盘血管生成抑制因子,据文献报道PRP仅表达于雌性胎盘组织。因此,尽管此基因发现至今已有20多年,但一直被排除在雄性之外,直接的实验研究仅见于几篇文献报道。我们在前期实验中偶然发现PRP表达于睾丸,因此本研究拟探索PRP在睾丸中的表达定位,PRP是否在雄性动物表达,及其在雄性生殖功能中的作用,PRP对人类肿瘤细胞生长的影响。<br>　　 方法:<br>　　 采用原位杂交和免疫组化方法对PRP进行组织学定位,Real-TimeRT-PCR方法研究PRP在大鼠睾丸表达水平与年龄的关系以及人参皂苷对PRP表达的影响。<br>　　 利用BLOCK-iTTM HiPerformTM Lentiviral PolⅡ miR RNAiExpression System with EmGFP试剂盒制备和包装PRP-RNAi慢病毒,以miRNA方式干扰PRP表达。用Real-Time RT-PCR方法检测PRP沉默后对睾酮分泌相关基因的影响,及对HCG诱导睾酮分泌是否有影响,ELISA方法检测细胞睾酮产生情况。<br>　　 构建PRP基因荧光表达载体,重组质粒转染TM3细胞,流式细胞术分析TM3细胞周期分布。为了研究PRP对肿瘤细胞生长和增殖的影响,转染SGC-7901肿瘤细胞,分析肿瘤细胞增殖改变和周期分布。<br>　　 结果:<br>　　 1免疫组化和原位杂交结果显示PRP阳性免疫染色位于睾丸间质细胞。免疫荧光染色显示PRP在TM3细胞胞浆中表达。<br>　　 2 PRP在大鼠睾丸中的表达模式为随年龄增加而增加。有趣的是,人参皂苷可以显著下调老年大鼠睾丸PRP表达水平。HCG通过PKA途径显著上调TM3细胞中PRP表达水平。<br>　　 3慢病毒介导PRP沉默减弱HCG刺激睾酮产生的作用。另外,PRP沉默后抑制HCG刺激PRLR mRNA增加的作用,且PRL促进HCG诱导睾酮产生的作用也因为PRP沉默而减弱,表明了PRP可能通过影响PRLR表达而参与到睾酮合成。<br>　　 4对细胞生长和细胞周期的研究表明PRP可能对细胞增殖有抑制作用。<br>　　 结论:<br>　　 1我们首次发现PRP在睾丸间质细胞表达。<br>　　 2人参皂甙可以显著下调老年大鼠睾丸PRP表达水平。<br>　　 3 PRP基因沉默后减弱了HCG刺激睾酮产生的作用。<br>　　 4 PRP对肿瘤细胞增殖有抑制效应。