SPC对人真皮成纤维细胞中MMP-1、MMP-2、MMP-3表达影响的研究-论文-万方医学网

SPC对人真皮成纤维细胞中MMP-1、MMP-2、MMP-3表达影响的研究

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摘要目的:本实验采用人真皮成纤维细胞作为实验模型,研究神经鞘氨醇磷酸胆碱(sphingosylphosphorylchoine,SPC)对人真皮成纤维细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响,探讨SPC促进皮肤创伤愈合作用机制。<br>　　方法:采用组织块消化法培养人真皮成纤维细胞,取4-10代进行实验,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blotting)的方法半定量检测经SPC诱导的人真皮成纤维细胞中MMP-1、MMP-2、MMP-3 mRNA水平和蛋白水平的表达。<br>　　结果:采用组织块消化法培养人真皮成纤维细胞,与传统的消化法和组织法比较,成功率较高。SPC以时间梯度(2、6、12、24和48小时)诱导人真皮成纤维细胞后,RT-PCR结果显示,mRNA的表达水平产生了不同程度的变化,MMP-1、MMP-3在SPC作用2小时左右时逐渐升高,六小时左右达到高峰,维持一段时间后下降。MMP-2 mRNA的表达水平变化不显著。Western blotting分析显示,SPC对MMP-1、MMP-3蛋白水平的影响同样具有时间依赖性,MMP-2蛋白表达变化不明显。<br>　　结论:SPC促进人真皮成纤维细胞MMP-1、MMP-3的表达,进而参与调节细胞外基质,可能为SPC促进皮肤创伤愈合的作用机制之一。