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摘要目的：为揭示胚胎干细胞(ESC)维持自我更新和全能性的机制，本实验通过观察Oct4和miR-302在RA诱导P19细胞过程中表达水平的变化，探讨Oct4和miR-302在细胞分化过程中的特点，为后续研究Oct4对miR-302的调控研究奠定基础。<br>　　 方法：常规于培养瓶内培养细胞，培养液MEM-α完全培养(含10％优级胎牛血清，青霉素100 U/ml、链霉素100μg/ml)，取同时传代至指数生长期的瓶装细胞，以抽签法随机分配各组分为对照组和实验组，对照组更换新培养液时加入体积分数10％胎牛血清的MEM-α培养液，实验组更换新培养液并加RA，使其终浓度为500 nmol/L。分别于更换新培养液后0h、24h、48h、72h收集各对照组和实验组的P19细胞。采用半定量Real-time PCR检测RA连续诱导培养的不同时间段中Oct4和miR-302的表达情况。<br>　　 结果：半定量Real-time PCR检测表明，P19细胞经500 nmol/L的RA作用后，与对照组相比，随着RA诱导时间的增加，Oct4和miR-302的表达呈显著下降。与RA诱导前相比，P19细胞经500 nmol/L的RA作用后，随着诱导时间的不断增加，Oct4和miR-302显著下降，各时间点差异显著。<br>　　 结论：Oct4和miR-302在胚胎癌细胞(P19细胞)未分化前高表达，在细胞分化后表达显著下降，甚至不表达。miR-302的表达限制在细胞多能性阶段，在细胞分化后表达下降，暗示了miR-302是维持胚胎癌细胞(P19细胞)自我更新和多潜能性的一个重要因子。细胞分化后，Oct4的表达下降伴随着的miR-302下降，暗示了Oct4可能调节miR-302的表达。