羧基化多壁碳纳米管-聚吡咯修饰电极的沙门氏菌DNA传感器-论文-万方医学网

羧基化多壁碳纳米管-聚吡咯修饰电极的沙门氏菌DNA传感器

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摘要目的：利用电化学DNA传感器技术，建立一种简单快速的沙门氏菌检测方法。<br>　　方法：新蒸的单体吡咯和羧基化多壁碳纳米管通过电沉积(循环伏安扫描：20mV/s，10圈)聚合到电极表面，形成均匀、牢固的修饰层。亲和素在偶联剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDAC)和N-羟基硫代琥珀酰亚胺(sulfo-NHS)作用下与电极表面的羧基结合，被固定到电极表面。亲和素与生物素之间存在很强的亲和作用，通过二者的结合，将生物素化探针DNA固定到修饰电极表面。采用电化学阻抗法测定杂交前后的电极阻抗值(Ret)，建立杂交前后阻抗差值(△Ret)与目的基因浓度之间的线性关系。扫描电子显微镜(SEM)下可见聚吡咯和羧基化多壁碳纳米管修饰的电极表面致密、多孔，说明修饰电极比表面积增大。用电化学方法表征发现修饰电极的循环伏安电流增大、交流阻抗减小，说明修饰电极的电荷传导能力增强。<br>　　结果：以沙门氏菌特异ssDNA基因序列为探针，在最佳杂交条件下：杂交温度50℃，杂交时间1小时，该传感器检测靶基因的线性范围为1.0×10-9mol/L～1.0×10-7mol/L，检测下限5.0×10-10mol/L。回归方程：y=8.9558x+112.09，相关系数：R=0.9984。传感器可再生并重复使用8次。<br>　　结论：用聚吡咯和羧基化多壁碳纳米管修饰玻碳电极、生物素-亲和素法固定DNA探针，研制出一种沙门氏菌DNA电化学传感器，可用于沙门氏菌的定量检测。