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摘要阿尔茨海默氏症是一种中枢神经系统的退变性疾病，其主要的临床表现为记忆、理解和判断等认知功能障碍。Aβ1-42是淀粉样多肽前体蛋白被β-分泌酶和γ-分泌酶进行顺序酶切的产物。Aβ1-42的聚集对阿尔茨海默氏症的发生、发展至关重要。对Aβ进行的分子动力学模拟研究表明Aβ多肽在构象转变的过程中经历了一种α-螺旋/β-折叠的稳定中间体构象，我们以这种稳定中间体构象为靶标，找到了一个Aβ聚集抑制剂DC-AB1，对其进行了结构优化得到了34个新颖的衍生物。在ThT荧光实验中，有9个衍生物表现出了比DC-AB1更好的抑制活性。而在这9个衍生物中，化合物43表现出了更为出色的抑制活性，在圆二色谱、光诱导偶联和原子力显微实验中，化合物43不但可以抑制Aβ多肽发生聚集而且可以使已经聚集的Aβ多肽解聚。进一步的细胞实验证明，化合物43还可以有效地抑制Aβ1-42诱导的细胞毒性并能够增加细胞的存活率。根据上述实验结果，这些结构新颖的小分子化合物有可能成为治疗AD和其它神经退行性疾病的潜在药物。<br>　　 为了将Aβ1-42锁定在一种单体的状态，我们将其重组到Bcl-xL蛋白的一段无结构的区域中。Aβ1-42的N端和C端都限定在这段无结构的区域里，重组蛋白中的Aβ1-42序列并没有引入额外的折叠，而是帮助其在溶液中保持了稳定的单体状态。通过这种重组的嵌合蛋白Bcl-xL-Aβ1-42，我们建立了一种酶联免疫吸附的方法，用这种方法可以比较化合物与单体Aβ1-42的结合力。这种方法不仅能够验证以往报道的Aβ1-42抑制剂的活性，还能够根据抑制剂与单体或是纤维结合的特点将不同种类的抑制剂区分开。用这种筛选方法，我们还成功地发现了一个新的Aβ1-42的小分子抑制剂。<br>　　 Aβ1-42可溶性的多聚体形式在AD的发生过程中引起了神经损伤和细胞死亡。通过使用DEPC对Aβ1-42的氨基酸残基进行修饰发现，Aβ1-42的多聚体在其N端存在局部的折叠区域，当环境的pH值为7.4或5.7的时候，这个区域内分别有1个或2个组氨酸残基包埋在多聚体内部，而Aβ1-42中的His6在这两种酸碱条件下则一直暴露在多聚体外侧。DEPC对Aβ1-42的修饰还显著降低了Cu2+与Aβ1-42的结合力，这种结合力的降低表明His6对于Aβ1-42与Cu2+的结合是至关重要的。<br>　　 SIRT1蛋白是一种NAD+依赖的去乙酰化酶，SIRT1除了可以使组蛋白发生去乙酰化，还可以催化很多非组蛋白发生去乙酰化并以此发挥其生物学功能。SIRT1不仅在代谢过程中可以降低能量的摄入，对神经系统也有显著地调节功能。在亨廷顿舞蹈症、帕金森氏症和阿尔茨海默氏症的动物模型中也发现，由SIRT1活性升高所导致的能量摄入的降低对保护神经细胞免于发生退行性病变具有重要作用。由于SIRT1在生物体内的重要生物学作用，寻找其激动剂变得尤为紧迫。目前有实验证据表明，对SIRT1活性的调节可以通过其变构位点来完成。Kim等人首先报道了一种核蛋白，名为AROS，是SIRT1的一种内源性激动蛋白，可以通过与SIRT1 N端的变构位点相互作用而提高SIRT1的酶活。鉴于AROS蛋白的重要作用，我们表达、纯化了这种蛋白，并试图培养SIRT1 N端变构位点与其激动蛋白AROS的复合物晶体。