检索历史 清除

摘要脂肪酸合酶(FAS，E.C.2.1.3.85)催化体内长链脂肪酸的合成，是参与体内能量代谢的一个重要的酶，自然界中主要以FASⅠ和FASⅡ两种形式存在。FASI存在于动物中，是一个包含多个活性中心的复合酶；FASⅡ存在于细菌和植物中，是多个独立蛋白构成的酶系。最近两类脂肪酸合酶都被提出是不同类型新药开发的靶点。FASI是治疗和预防肥胖症的潜在靶点，而FASⅡ抑制剂有望研发成为新型的抗菌剂。到目前为止，具有实用价值的两类型的FAS抑制剂还十分稀缺。单宁是植物界中广泛存在的一类化合物，由于其对蛋白质的非特异性聚沉作用，在分离活性成分的时候往往作为杂质最先被除去。但是我们的研究发现可水解类单宁在低浓度时对FAS表现出强的抑制活性，并且并不聚沉FAS。<br>　　 石榴是一个全世界食用的水果，并且有多种生物活性报道。我们发现石榴皮提取物有效抑制FAS活性，快结合抑制IC50值为4.1μg/ml，并且表现出慢结合抑制活性。石榴皮富含可水解单宁，其中含量最高的鞣花单宁类成分鞣花酸和安石榴苷对FAS抑制作用IC50值分别为1.31μg/ml(4.34μM)和4.2μg/ml(4.50μM)，并且有慢结合抑制。进而，这三个抑制剂可显著抑制脂肪细胞3T3-L1分化过程中脂质的积累。100μg/ml石榴皮提取物，5.24μg/ml(5μM)的安石榴苷和4.5μg/ml(15μM)鞣花酸即可降低50％以上的脂滴积累。安石榴苷和鞣花酸对FAS及脂肪细胞的抑制能力都强于已报道的FAS抑制剂。对FAS的聚沉实验证明，它们抑制FAS活性和脂肪细胞脂质积累的浓度大大低于聚沉FAS的浓度，表明它们的这些生物学活性与其沉淀蛋白的性质无关。石榴皮提取物，安石榴苷和鞣花酸作为FAS抑制剂具有开发为减肥用品的前景。同时，对FAS的抑制也为石榴及鞣花单宁的生理功能提供了一个新的合理的解释。<br>　　 单宁酸属没食子单宁，是另一种可水解单宁，在水果，谷物和许多植物性饮料中大量存在。单宁酸抑制FAS的IC50值仅为0.23μg/ml，强于以往发现的FAS抑制剂。而且单宁酸对脂肪细胞3T3-L1表现出剂量依赖性抑制，2.5μM和5μM单宁酸即可减少脂质积累40%和64%。MTT实验结果显示，单宁酸在抑制脂质积累的同时对3T3-L1细胞活力没有明显的影响。同时测定表明，单宁酸抑制脂肪细胞分化指标PPARY和FAS的表达。沉淀蛋白实验也显示了单宁酸抑制FAS及脂肪细胞的生物活性与其沉淀蛋白的性质无关。这些结果提示我们单宁酸通过抑制FAS活性，影响脂肪细胞分化过程中分化信号的维持，从而抑制脂肪细胞的分化和脂质积累。另一项工作有关FASⅡ系统中的FabG(β-酮酰-ACP还原酶)抑制剂。研究表明来源于丹麦，加拿大和中国的五种不同枫叶(Acer platanoides，Acer campestre，Acer rubrum，Acer saccharum and Acer truncatum Bunge)提取物及其主要成分单宁酸抑制24株标准菌株的生长，最小抑菌浓度范围为0.3-8.0mg/ml。不同于环氧氟沙星(LFX)，这些样品对革兰氏阳性菌比对革兰氏阴性菌抑制更强，并且有效地抑制两株耐药菌的生长，表明这些样品的抑菌机制不同于LFX。测定表明这些样品能有效抑制FabG，单宁酸则表现最强的抑制能力，ICso值为0.78μM(0.81μg/ml)。进一步研究发现，单宁酸和元宝枫及糖槭叶提取物还能不可逆抑制FabG，并且抑菌能力强于其他样品。因此，FabG可能是这些枫叶提取物和单宁酸抑制细菌生长的靶点，而且其对FabG的不可逆抑制对抑菌能力有重要影响。