换一批
换一批摘要目的:验证三叶因子2(TFF2)与转录因子Sp3的结合关系,初步研究TFF2及Sp3相互作用在胃癌细胞中的功能,进而探索二者的作用机制,从而为胃癌的早期诊断及分子靶向治疗提供理论依据和新的方向。<br> 方法:本研究在前期的酵母双杂交实验基础上,筛选TFF2候选结合蛋白Sp3,使用免疫荧光共聚焦及免疫共沉淀方法,明确TFF2及Sp3的共定位及结合关系;利用siRNA干扰及过表达技术,构建稳定干扰Sp3和(或)过表达TFF2的4株BGC-823胃癌细胞株,通过Brdu、细胞流式、Transwell小室等技术,检测TFF2及Sp3对胃癌细胞增殖、凋亡、周期、迁移及侵袭能力的影响;使用蛋白芯片技术检测TFF2与Sp3对凋亡信号通路蛋白的影响,用Western blot进一步明确相关信号通路蛋白水平的变化情况,深入研究TFF2与Sp3在胃癌细胞凋亡和细胞周期的作用机制。<br> 结果:实验前期,我们通过酵母双杂交系统,得到TFF2的候选结合蛋白转录因子Sp3,经免疫荧光共聚焦及免疫共沉淀证实TTF2与Sp3存在共定位及结合关系。体外细胞功能实验显示,Sp3增强胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力,而对细胞周期具有促进作用;TFF2则抑制胃癌细胞的增殖、迁移能力,将细胞周期阻抑于G1期,促进细胞凋亡及侵袭能力;而过在二者共同存在时,胃癌上述功能亦有明显改变。信号通路蛋白电泳分析显示,TFF2与Sp3对Bcl2家族蛋白和NFκB信号通路蛋白具有显著的影响。<br> 结论:转录因子Sp3是TFF2的结合蛋白,TFF2与Sp3可影响胃癌细胞的增殖、凋亡、周期、迁移及侵袭等功能,且二者存在相互作用,并可影响胃癌的发生发展。<br>
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