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摘要小麦是世界上种植面积仅次于水稻的重要粮食作物。麦蚜是危害小麦生长的重要害虫之一,主要通过直接取食或传播病毒来影响小麦正常生长,由于其繁殖力强,世代周期短,危害高峰正处于小麦的抽穗、灌浆等重要时期,因此严重威胁着小麦的产量。为了防治麦蚜而使用大量农药不仅对麦田生态造成了严重的影响,还会提高麦蚜的抗药性,因此培育新的抗蚜小麦品种已成为小麦生产的首要目标。目前应用小麦的抗蚜基因主要是雪花莲外源凝素(Galanthusnivalisagglutinin;GNA)基因,本试验选用的是掌叶半夏凝集素(Pinelliapedatisectaagglutinin;PPA)基因。本试验利用农杆菌介导法将PPA基因转入小麦愈伤组织,筛选出阳性愈伤组织并使其分化成苗,同时建立一种较为成熟的小麦遗传转化体系。<br>　　 本试验采用了“石4185”、“扬麦12”“Bobwhite”等3种小麦品种,在确定受体材料环节,研究了不同品种之间、不同激素配比等因素对小麦愈伤组织的诱导及分化的影响。在遗传转化试验中,研究了不同菌种、不同启动子及不同品种的小麦愈伤组织对GUS标记基因的瞬时表达效果。之后经过一系列的筛选、分化、壮苗等试验过程从而获得阳性植株。<br>　　 试验结果表明,小麦幼胚愈伤组织较小麦成熟胚愈伤组织更适合作为转化受体材料。“石4185”、“Bobwhite”的瞬时表达效果要好于“扬麦12”。重悬前后农杆菌菌液的浓度对后续实验的影响很大,重悬液重悬前后菌液浓度OD600都应该在0.6-0.8之间才能在脱菌过程中有效地控制农杆菌的生长;农杆菌侵染小麦愈伤组织的时间应为30min;脱菌液中抗生素特美汀的浓度为500mg/L;小麦愈伤组织在脱茵液中浸泡时间为30min时最佳;与UBI启动子相比35S启动子能更好地启动标记基因GUS的表达;在所使用的四种不同的农杆菌中EHAl05(35S-PPA-GUDS)的GUS瞬时表达效果最好。筛选培养基中筛选剂潮霉素的浓度为50mg/L;小麦愈伤组织最适的分化培养基为MS+蔗糖30g//L+KT2.0mg/L+NAA0.1mg/L+Timentin250mg/L+植物凝胶2g/LL,pH5.8;PCR检测获得了阳性植株。