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摘要目的：Wnt信号通路是一条进化上保守的信号传导途径，从低等生物至高等哺乳动物都有高度同源性，它调控细胞的增殖、分化和凋亡，在胚胎发育和细胞命运的决定中发挥重要作用。Wnt信号通路的紊乱与人体多种恶性肿瘤的发生发展有一定关系，特别是经典信号通路Wnt/β-catenin信号通路与原发性肝癌形成的有关。<br>　　本实验用免疫组织化学技术研究Wnt/β-catenin信号通路中Wnt-1、β-catenin及Axin-1等蛋白在肝细胞癌、癌旁硬化肝组织及血管瘤旁肝组织中的表达特点，进一步探讨Wnt/β-catenin信号通路在原发性肝癌患者中的临床意义。<br>　　方法：<br>　　1、研究对象标本为50例肝细胞癌癌组织、50例癌旁硬化肝组织及7例肝血管瘤周边肝组织(作为对照)均来自河北医科大学第四医院肝胆外科2008年4月～2009年5月手术切除标本。所有组织类型均经河北医科大学第四医院病理科确诊。所有患者术前均未进行任何形式的治疗。<br>　　2、研究方法：组织切除后经10％中性甲醛固定后石蜡包埋备用。应用免疫组织化学技术检测Wnt-1、β-catenin及Axin-1在肝细胞癌癌组织、癌旁硬化肝组织及血管瘤旁肝组织中的表达情况，分析各蛋白在这三种肝组织的表达差异。对肝癌患者的临床资料进行汇总，分析蛋白表达与肝细胞癌患者临床表现间的关系。随访患者生存情况，了解各蛋白表达不同对肝癌患者预后的影响。<br>　　结果：<br>　　1、临床资料对肝癌患者术后生存的影响：性别、年龄、病灶大小、HBsAg等对肝细胞癌患者的预后的影响无显著性差异，而临床分期(Ⅰb+Ⅱa期、Ⅱb+Ⅲa期)(x2=14.951，P=0.000)、病理分级(x2=19.937，P=0.000)、血清AFP(x2=13.808，P=0.000)、HbeAb阳性(x2=9.907，0.002)及瘤栓或伴有肝远处转移(x2=19.381，P=0.000)对肝细胞癌患者的预后的影响有显著性差异。临床分期较早、病理分化好、AFP较低、HbeAb阴性及不伴有门脉瘤栓或肝远处转移者，生存率较高，平均生存时间较长，预后较好。<br>　　2、Wnt-1蛋白在肝血管瘤旁肝组织中几乎不表达，或少量在胞膜和胞质显淡黄色呈颗粒状表达；在肝癌旁肝组织中大部分不表达，少部分在胞膜和胞浆中显淡黄色、黄色呈散在絮状表达；在肝癌组织中大部分表达，为黄色到棕色，呈团块状连续表达。Wnt-1蛋白在血管瘤旁肝组织及癌旁肝组织中表达无明显差异(Z=-0.560，P=0.567)；在血管瘤旁肝组织和肝癌组织中表达有显著差异(Z=-3.110，P=0.002)；在癌旁组织及肝癌组织中表达有显著差异(Z=-5.635，P=0.000)。Wnt-1在肝癌组织中的表达与年龄、性别、HbsAg阴阳性、AFP、肿瘤大小无关，与有无门脉瘤栓及肝远处转移无关；在HbeAb阴性者肝癌组织中表达较强(Z=-2.437，P=0.015)；Wnt-1在肝癌组织中的表达与临床分期及病理分化无明显关系；在肝癌组织中的表达与患者预后有明显关系，阴性者6个月生存率为100％，12个月生存率为100％，24个月生存率50％，平均生存时间为30.3个月；弱阳性者6个月生存率100％，12个月生存率为57.1％，24个月生存率为7.1％，平均生存时间为14.9个月；阳性者6个月生存率为68.8％，12个月生存率为31.2％，24个月生存率为6.2％，平均生存时间为12.1个月；强阳性者6个月生存率为53.3％，12个月生存率为20％，24个月生存率为0％，平均生存时间为9个月，有统计学意义(x2=8.842，P=0.03)。<br>　　3、β-catenin在血管瘤旁肝组织、癌旁肝组织及肝癌组织中均有表达。在血管瘤旁及癌旁肝组织中主要表达于细胞膜上，为棕色呈线性连续分布，它们之间无明显差异(Z=-0.240，P=0.810)；在肝癌组织中，β-catenin可出现细胞膜表达缺失，膜上表达不连续，或出现胞质胞浆呈片状等异常表达。β-catenin在血管瘤旁和肝癌组织中表达有显著差异(Z=-3.111，P=0.002)；在癌旁组织及肝癌癌组织中表达有显著差异(Z=-5.590，P=0.000)。β-catenin在肝癌组织中的表达与年龄、性别、HBeAb阴阳性、HbsAg阴阳性及肿瘤大小无关；在有肝远处转移或门脉瘤栓的癌组织中异常表达明显(Z=-2.588，P=0.010)；β-catenin在AFP≥400ng/ml的肝癌组织中异常表达明显，有统计学意义(Z=-3.678，P=0.000)；β-catenin在肝癌临床分期较晚(Ⅱb+Ⅲa)的癌组织中异常表达明显(x2=16.493，P=0.001)；在病理分化差中异常表达明显(x2=23.396，P=0.000)。β-catenin表达正常者6个月生存率为100％，12个月生存率100％，24个月生存率为30％，平均生存时间为25.9个月；β-catenin表达异常者6个月生存率67.6％，12个月生存率24.3％，24个月生存率为2.7％，平均生存时间为10.1个月，单变量Log-rank检验，预后有显著差异(x2=16.387，P=0.000)。β-catenin表达异常的患者生存期短，表达正常的患者生存期长。<br>　　4、Axin-1蛋白在肝癌组织、肝癌旁组织及血管瘤旁肝组织都显黄色到棕色，呈散在或团簇状较强表达，无明显差异。Axin-1蛋白在血管瘤旁肝组织和癌旁肝组织表达无差异(Z=-0.616，P=0.538)，在血管瘤旁肝组织和肝癌组织表达无差异(Z=-0.920，P=0.358)，在癌旁肝组织和肝癌组织表达无差异(Z=-0.548，P=0.584)。Axin-1蛋白在肝癌组织中的表达与年龄、性别、HBeAb阴阳性、乙肝有无、肿瘤大小无关，与有无门脉瘤栓及肝远处转移无关；Axin-1蛋白在肝癌组织中的表达与临床分期无明显关系(x2=3.930，P=0.269)，与病理分级无明显关系(x2=4.630，P=0.099)，与患者预后也没有明显关系(x2=5.615，P=0.06)。<br>　　5、用CoxRegression方法分析多因素对患者预后的影响，发现只有β-catenin表达对患者预后有直接影响，P=0.013，有统计学意义。<br>　　6、Wnt-1和β-catenin同时高表达于肝癌组织中，它们在肝癌中表达差异有统计学意义(Z=-3.590，P=0.000)，呈正相关，Wnt-1表达呈阳性或强阳性情况下β-catenin异常表达率高(r=0.513，P=0.000)；Wnt-1蛋白和Axin-1蛋白在肝癌组织中的表达差异没有统计学意义(X2=5.768，P=0.123)；β-catenin和Axin-1蛋白在肝癌组织中的表达差异没有统计学意义(Z=-0.104，P=0.917)。<br>　　结论：<br>　　1、Wnt-1蛋白在肝血管瘤旁、肝癌旁及肝癌组织中的表达有显著差异，在肝癌组织中表达显著增强。<br>　　2、β-catenin在肝血管瘤旁、肝癌旁及肝癌组织中的表达有显著差异，在肝癌组织中异常表达率显著升高。伴有癌栓或远处转移、血清AFP值较高、临床分期较晚期、病理分化差者异常表达率高，预后较差，生存期较短。<br>　　3、Axin-1蛋白在肝癌组织、肝癌旁组织及血管瘤旁肝组织表达无明显差异。<br>　　4、Wnt-1阳性表达和β-catenin在肝癌组织中的异常表达呈正相关性，Wnt-1阳性或强阳性者β-catenin异常表达率较高。β-catenin是Wnt经典通路的关键蛋白，其编码基因有望成为今后肝细胞癌治疗的新靶点。