• 医学文献
  • 知识库
  • 评价分析
  • 全部
  • 中外期刊
  • 学位
  • 会议
  • 专利
  • 成果
  • 标准
  • 法规
  • 临床诊疗知识库
  • 中医药知识库
  • 机构
  • 作者
热搜词:
换一批
论文 期刊
取消
高级检索

检索历史 清除

医学文献>>
  • 全部
  • 中外期刊
  • 学位
  • 会议
  • 专利
  • 成果
  • 标准
  • 法规
知识库 >>
  • 临床诊疗知识库
  • 中医药知识库
评价分析 >>
  • 机构
  • 作者
热搜词:
换一批

草鱼PKZ的功能分析

摘要PKR-like(PKZ)是近年来在鲫鱼、斑马鱼(Danio rerio)、大西洋鲑(Salmosalar)、稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)和草鱼(Ctenopharyngodon idella)中报道的一个蛋白激酶,由于其N端为Z-DNA结合域(Za),因此,将它命名为PKZ(proteinkinase containing Z-DNA binding domain)。有趣的是,PKZ的C-端也具有12个保守的eIF2α激酶催化域,与PKR(double-stranded RNA dependent protein kinase)非常相似。<br>   初步研究表明PKZ与PKR非常相似,也与宿主细胞抗病毒有关。如鱼类PKZ基因的本底表达非常微弱,当干扰素等诱导后,表达上调。此外,与其eIF2a激酶家族其他成员一样,斑马鱼PKZ、大西洋鲑PKZ也能够抑制细胞蛋白质的合成。尽管如此,对Z-DNA如何调节及激活鱼类PKZ还不清楚。<br>   基于此,我们根据本实验室已克隆的草鱼PKR-like(PKZ)(GU299765),构建了原核表达载体,并在体外进行表达、纯化。对所得草鱼PKZ全长蛋白进行功能分析表明:原核表达的草鱼PKZ本身就已经被磷酸化了。以磷酸酶使之去自磷酸化后,PKZ就失去了激酶活性。我们还发现Z-DNA可以使去自磷酸化的PKZ重新激活,然后磷酸化elF2α。而Poly I:C却无法使之重新活化。体内实验表明:草鱼PKZ能够在翻译水平上极大地抑制荧光素酶的产生,说明它能够抑制蛋白质的翻译。其198位点突变后,几乎完全失去阻碍翻译的功能。此外,调节区Zα的缺失对其功能也影响极大。<br>   另外,草鱼:PKZ启动子的序列分析表明其上存在干扰素调节因子1(IRF-1)的结合位点。基于此,我们利用原核表达的IRF-1的多肽与PKZ启动子序列进行了琼脂糖凝胶阻滞实验,结果表明,IRF-1可与PKZ启动子结合。这个结果为我们构建真核表达载体,进一步在体内分析二者的结合情况,以及探索IRF-1调控草鱼PKZ的转录做好了准备。<br>   依据本实验中所得结果,以及分析以往对PKZ的研究成果,我们在不排除前人提出的PKZ抗病毒通路的前提下,提出一条新路径以供参考。这条通路与以往PKZ激活的“被动”模式不同,我们认为PKZ有可能存在一条内源性激活通路,这种激活模式对于细胞应激占据主动地位具有重要意义。而此通路的提出在一定程度上弥补了旧通路的不足之处。

更多
广告
  • 浏览0
  • 下载0

加载中!

相似文献

  • 中文期刊
  • 外文期刊
  • 学位论文
  • 会议论文

加载中!

加载中!

加载中!

加载中!

特别提示:本网站仅提供医学学术资源服务,不销售任何药品和器械,有关药品和器械的销售信息,请查阅其他网站。

  • 客服热线:4000-115-888 转3 (周一至周五:8:00至17:00)

  • |
  • 客服邮箱:yiyao@wanfangdata.com.cn

  • 违法和不良信息举报电话:4000-115-888,举报邮箱:problem@wanfangdata.com.cn,举报专区

官方微信
万方医学小程序
new翻译 充值 订阅 收藏 移动端

官方微信

万方医学小程序

使用
帮助
Alternate Text
调查问卷