换一批
换一批摘要及氢酶结构基因的保守性给制备吸氢(hup)基因探针带来便利.粘性质粒pAL618中含有来自豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum)的完整的hup基因.提取pAL618并从中分离hup结构基因片段,用缺口平移法将Biotin-ll-dUTP掺入到hup结构基因DNA中,制备成生物素化的hup基因探针.为了能大量方便地获得hup结构基因DNA,以pUC19为载体,大肠杆菌(Escherichia coli)JM101为受体菌构建了hup结构基因部份区段的亚克隆,并以兰/白反应、质粒检测、酶切分析、斑点杂交第四种检测措施确认hup结构基因片段已插入载体中.此外还应用PCR技术标记生物素化DNA探针,也取得了令人满意的结果.实验证明该探针检测系统对根瘤菌较为可靠,并可能在hup基因的克隆筛选及hup结构基因的定位研究中发挥作用.
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