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摘要脑卒中是人类疾病致残的首要病因，全球第二大死因，是一种高发病率、高致残率、高病死率的严重公共卫生问题。缺血性脑卒中是脑血管病的最常见类型，占脑血管病的60％-80％，发病率高、后遗症严重。但是目前的治疗方法效果一般，其中抓住治疗时机是治疗的关键，所以及时准确的诊断就显得尤为重要。传统的影像学诊断方法，如CT、MRI等，多基于生理及解剖结构的改变。而一种新的诊断方法——分子影像学，相对于离体检测，其优势在于能实时、无创地对同一机体进行纵向动态的观察，获得分子水平的系统信息。而且它检测的是基因及分子水平的改变，而不是它们的后续结果——形态及结构的改变，因此这种方法可以更敏感、更及时的提供疾病的相关信息，以便给予及时准确的治疗。在分子影像学中，最关键的问题是要有特异性的分子探针。PSVue794(PS794)是一种新型的荧光分子探针，由功能单位和报告单位两部分组成。功能单位是bis[zinc(ID-dipicolylaminel(Zn-DPA)基团，可以特异性的结合凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸；报告单位是一种近红外荧光染料基团。本研究主要是探讨这种荧光探针在脑梗死定位及活体显影方面的应用。<br>　　Zn-DPA基团被报道可以与富含阴离子磷脂的细胞膜表面相结合，譬如暴露在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸。在健康细胞中磷脂酰丝氨酸基本都位于细胞膜的内膜侧。在细胞凋亡早期，磷脂分子的分布被打乱，导致磷脂酰丝氨酸出现在细胞膜的外表面。由于Zn-DPA分子对磷脂酰丝氨酸的亲和性，因而可以被用做检测细胞凋亡过程的生物标记物。我们的实验结果表明Zn-DPA不仅可以定位结合凋亡细胞，也可以结合坏死细胞。由于活体扫描的分辨率有限，以及动物体内实验混杂因素比较多等原因，我们选择使用细胞学实验方法探讨此探针对死亡细胞结合的能力及特点。通过不同方法处理HT22小鼠海马神经元细胞系来诱导细胞死亡，然后进行PS480和PI的复合染色，PI是一种坏死细胞的生物标记物。正常培养液培养的HT22海马神经元细胞无PS480及PI的染色，表明Zn-DPA不能结合健康的神经细胞。但是在无血清培养液、高谷氨酸盐培养液及HBSS缓冲液中培养的HT22海马神经细胞表现出阳性的染色结果，一部分是PI和PS480双阳性，这部分细胞是坏死细胞；另一部分是PI阴性PS480阳性，这部分应该是凋亡细胞。综上所述，我们的体外细胞学实验结果表明Zn-DPA基团既可以结合凋亡细胞，也可以结合坏死细胞。<br>　　本研究的结果表明了这种荧光探针在脑缺血疾病中的潜在应用性，即PS794可以被用作定位脑梗死的探针，可以标出损伤细胞的范围。中心部位的荧光强度最高，是梗死核心区，核心区向外荧光强度逐渐减弱。荧光强度较低的区域可能代表缺血半暗带的区域，这个区域内的细胞损伤较轻，给予适当的处理有恢复的可能。从这一点来看，根据不同部位的荧光强度，这个探针也可能可以用于判断不同部位的损伤程度。荧光强度越高，损伤的可能越严重。这种梗死区域的分层性表现有可能可以作为一个重要的指数，用于脑卒中患者组织损伤的识别及范围的判断，进而给予合适的治疗方法。<br>　　研究得出如下结论:<br>　　(1)Zn-DPA可以用于脑缺血疾病的研究，能特异性地与脑梗死区域结合，并保证与健康部位有较高的对比度。<br>　　(2)Zn-DPA近红外荧光探针-PS794，可用于脑缺血疾病的活体荧光成像研究，对脑梗死进行纵向动态观察，这也是本研究最有意义、最为新颖的发现。此染料能在体内稳定存在至少3天，最后由肝脏和肾脏代谢排出体外。<br>　　(3)Zn-DPA是一种比AnnexinV更加优秀、更有应用前景的死亡细胞探针。本研究也发现Zn-DPA不仅可以与凋亡细胞结合，也可以与坏死细胞结合。