检索历史 清除

摘要第一部分 LHRHa靶向紫杉醇微泡的制备及其性质检测<br>　　目的：制备LHRHa靶向紫杉醇微泡，对其性质进行检测，与普通紫杉醇微泡进行稳定性比较。<br>　　方法：采用机械振荡法制备LHRHa靶向紫杉醇微泡和普通紫杉醇微泡，测定其粒径、电位、包封率及载药量，观察在不同储存条件下微泡特性的改变。<br>　　结果：LHRHa靶向紫杉醇微泡平均粒径为1864.5±245.4nm，Zeta电位为-(9.59±3.23)mV，包封率为(73.1±1.6)％，载药量为(20.8±1.2)％，微泡在4℃、-20℃储存48小时其特性无明显改变，但72小时后其数量明显减少。普通紫杉醇微泡平均粒径为1442.3±296.5nm，Zeta电位为-(8.45±2.02)mV，包封率为(96.5±1.4)％，载药量为(26.8±0.93)％，微泡在4℃、-20℃储存14天其特性无明显改变，21天后其数量开始减少。<br>　　结论：成功制备了LHRHa靶向紫杉醇微泡，其包封率较高，粒径均匀，但较普通紫杉醇微泡稳定性差。<br>　　第二部分 LHRHa靶向紫杉醇微泡体内靶向能力初步研究<br>　　目的：建立裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤模型，观察肿瘤生长规律，研究PLMT的体内寻靶能力。<br>　　方法：采用细胞悬液注射法建立人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型，观察模型动物肿瘤的生长规律，HE染色观察肿瘤形态，免疫组化法检测肿瘤组织中LHRH受体的表达情况。将建模后三周的裸鼠4只随机分为PLMT组和PLM组，每组2只。其中PLMT组裸鼠给予荧光标记的PLMT，PLM组给予荧光标记的PLM，给药后20分钟断颈处死裸鼠，剥取肿瘤行冷冻切片，用荧光显微镜观察荧光素分布情况。<br>　　结果：裸鼠腹腔移植瘤模型的成瘤率为100％，荷瘤鼠平均成瘤潜伏期为13.8±1.3天，中位生存时间分别为30±1.095天，平均腹水量1.075±0.714ml，肿瘤组织高度表达LHRH受体。冰冻切片结果见荧光素在肿瘤的分布PLMT组明显多于PLM组。<br>　　结论：人卵巢癌细胞株A2780/DDP裸鼠腹腔移植瘤模型易于建立，是研究卵巢癌治疗较理想的动物模型，PLM工具有良好的体内寻靶能力。<br>　　第三部分超声激发LHRHa靶向紫杉醇微泡治疗裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤的初步研究<br>　　目的：探讨超声辐照LHRHa靶向紫杉醇微泡对裸鼠腹腔移植瘤的生长抑制效应及其机制。<br>　　方法：采用细胞悬液注射法建立人卵巢癌细胞株A2780/DDP裸鼠腹腔转移瘤模型，将荷瘤鼠随机分为7组(Ⅰ组PBS组，Ⅱ组PTX组，Ⅲ组PTX+US组，Ⅳ组PLM组，Ⅴ组PLM+US组，Ⅵ组PLMT组，Ⅶ组PLMT+US组)，每组7只。经不同处理后每组随机抽取2只处死剥取肿瘤组织做病理检查，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡，并用免疫组化法和Western blot法检测各组肿瘤组织Caspase3表达，免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度计数(MVD)。余下的观察生存期。<br>　　结果：与对照组比较，PLMT+US组、PLM+US组、PTX+US组、PTX组均能延长裸鼠生存时间(p<0.05)，且以PLMT+US组延长生存时间最长(p<0.05)，PLMT+US组荷瘤裸鼠中位生存时间为47±2.191天。PLMT+US组、PLM+US组、PTX+US组、PTX组细胞凋亡指数及凋亡相关蛋白Caspase3表达明显高于对照组(p<0.05)，以PLMT+US组最高(P<0.05)；PLMT+US组、PLM+US组、PTX+US组、PTX组VEGF表达率及微血管密度计数明显低于对照组(p<0.05)，其中以PLMT+US组VEGF表达及微血管密度计数最低(p<0.05)。<br>　　结论：超声联合LHRHa靶向紫杉醇微泡可以明显延长荷瘤鼠生存时间，其主要机制与诱导凋亡相关蛋白表达及抑制肿瘤血管生成有关。