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摘要第一部分：calponin3在耐药性颞叶癫痫患者及动物脑组织的表达及意义<br>　　目的：calponin3蛋白由CNN3基因编码，分布在突触后神经元的树突棘内，并抑制其运动。本课题组前期的基因芯片扫描研究发现耐药性癫痫患者脑内的CNN3基因表达上调。因此，我们想了解CNN3基因的功能执行单位calponin3蛋白是否参与了癫痫的发生与发展，明确痫样活动与脑内calponin3蛋白表达问的关系。<br>　　方法：将72只SD大鼠随机分为9组，其中8组腹腔注射氯化锂一匹罗卡品以建立慢性颞叶癫痫模型，另一组则注射生理盐水作为对照组。随机选取成功点燃后6小时、24小时、48小时、72小时、1周、2周、1月和2月的鼠颞叶组织为研究对象；癫痫患者的脑组织则来自前颞叶切除术后收集的30例耐药性颞叶癫痫患者的颞叶新皮质，分别用RT-PCR、免疫组化、免疫荧光、Western Blot检测CNN3基因及其编码的calponin3蛋白在癫痫患者和动物脑组织中的表达，了解表达的位置及变化规律，并与对照组进行比较。<br>　　结果：在耐药性颞叶癫痫患者的脑组织中，CNN3基因的mRNA和蛋白水平的表达均较对照组显著增强，在正常脑内神经元表达很低的calponin3蛋白在颞叶癫痫脑内神经元中则有明显的异常高表达。而在慢性颞叶癫痫鼠脑内，calponin3表达从点燃后6小时开始显著升高，并于48小时和2月时分别达到高峰。此外，在动物点燃后1周，海马CA1区的锥体细胞的树突呈现突出的calponin3免疫阳性反应。<br>　　结论：calponin3在脑内的表达与癫痫活动密切相关，反复的痫性发作导致脑内calponin3表达上调，后者又引发神经元的树突重塑，可能还参与了神经元间异常网络的形成。<br>　　第二部分：不同癫痫患者脑脊液中calponin3蛋白的检测及意义分析<br>　　目的：在本课题组前期的研究中，我们发现反复的痫性发作导致调节神经元树突棘活动能力的calponin3蛋白在耐药性颞叶癫痫患者和颞叶点燃鼠脑组织中表达均上调，脑内calponin3的表达升高后引发神经元的树突重塑，可能还参与了神经元异常网络的形成。由于脑组织取材困难，尤其是对耐药性癫痫患者反复取材进行研究基本是不可能的，而脑脊液是脑组织中许多重要产物代谢的主要途径，了解癫痫患者中脑脊液calponin3的水平有可能为临床提供一种反映该蛋白在癫痫患者脑内表达变化规律的窗口，成为识别耐药性癫痫的重要途径。<br>　　方法：纳入不同病程和治疗状态的癫痫患者126例和非癫痫对照组38例。同步采集实验组和对照组的脑脊液，运用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量测定两组患者脑脊液中的calponin3蛋白浓度后，利用受试者工作特征(ROC)曲线结合患者临床资料，评价脑脊液中calponin3浓度，探索用于识别癫痫和耐药性癫痫的可能性。<br>　　结果：与对照组患者比较，癫痫组患者脑脊液中的calponin3浓度显著升高，且与病程相关，耐药性癫痫患者脑脊液中calponin3的浓度更高。当脑脊液calponin3>1004ng/L时，鉴别癫痫和非癫痫时的曲线下面积(AUC)为0.843(P<0.001)，灵敏度58.54％，特异度94.29％；当脑脊液calponin3>1016.62ng/L时，鉴别耐药性癫痫和非耐药性癫痫时的AUC为0.763(P<0.001)，灵敏度84.78％，特异度64.94％。<br>　　结论：反复癫痫发作患者的脑脊液中calponin3水平升高，且与脑组织中的变化趋势相同，提示脑脊液calponin3水平可作为潜在的与癫痫发作相关的脑病理变化的生物标记物，并对癫痫和难治性癫痫的鉴别有参考价值。