检索历史 清除

摘要目的：本研究采用体外细胞培养方法，探讨单壁碳纳米管(single-walledcarbon nanotube，SWCNT)对大鼠肝细胞株(BRL)的细胞毒性，并从氧化性损伤、细胞凋亡角度探讨SWCNT可能的毒性作用机制。<br>　　方法：选择正常大鼠肝细胞株BRL，分别以剂量5μg/ml、30μg/ml、60μg/ml染毒，MTT法和上清液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase，LDH)含量的增加检测SWCNT的细胞毒性；利用倒置显微镜观察细胞形态学改变；并检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性和丙二醛(Malonaldehyde，MDA)含量；采用流式细胞术(Flow cytometer，FCM)检测SWCNT对细胞凋亡和细胞周期的影响；利用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Fas、Caspase-3的表达水平。<br>　　结果：随着SWCNT染毒剂量及时间的增加，BRL细胞存活率逐渐降低(P<0.05)，LDH释放量逐渐增加(P<0.05)，结果显示SWCNT对BRL细胞具有增殖毒性；随着SWCNT染毒剂量及时间的增加，BRL细胞中SOD、GSH-Px活性降低，MDA含量增加，且与对照组相比有统计学差异；流式细胞术结果显示，随着染毒剂量及时间的增加，BRL细胞凋亡率逐渐增加；SWCNT可选择性的将BRL细胞阻止在G0/G1期，使细胞不能完成正常的细胞周期；SWCNT可引起BRL细胞Fas蛋白和Caspase-3蛋白表达的增加。<br>　　结论：SWCNT可降低BRL细胞的存活率，对BRL细胞具有增殖毒性；SWCNT可对BRL细胞膜造成损伤；SWCNT可引起细胞脂质过氧化；SWCNT可导致细胞不能完成正常的细胞周期；SWCNT可引起细胞凋亡。SWCNT引起BRL细胞凋亡的可能机制是：SWCNT破坏细胞膜，进入细胞，阻滞细胞周期于G0/G1期，进而引起细胞凋亡；SWCNT可增加BRL细胞膜表面Fas蛋白和Caspase-3蛋白表达，通过Fas蛋白死亡受体途径诱导细胞凋亡。