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清肺通络方干预MPP小鼠TH17细胞信号途径的研究

摘要1.目的<br>  清肺通络方是治疗小儿支原体肺炎(MPP)的临床有效经验方,功效清肺化痰,活血通络。本研究选用BALB/c小鼠滴鼻法复制MPP模型,分别以清肺通络方、阿奇霉素以及半量阿奇霉素加清肺通络方组合治疗,研究中西医结合治疗方案的疗效,研究清肺通络方的体内抗感染作用,对MPP小鼠TH17细胞信号途径的调控,以及对血瘀相关指标的调节作用,为临床应用提供科学的实验依据。<br>  2.方法<br>  第一部分:选取BALB/c小鼠随机分成正常组、模型组、阿奇霉素组、清肺通络方组和中西医结合组,以MP国际标准株FH(MPFH)滴鼻造模,造模第二天开始治疗,于实验第5天、12天分别检测外周血及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数及分类,MP-DNA,肺组织病理观察肺部炎症;<br>  第二部分:检测BALF中白介素(IL)-17、白介素(IL)-6、转化生长因子β1(TGF-β1)水平,肺组织维甲酸相关孤儿核受体(RORγt)、细胞核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达;<br>  第三部分:检测血小板,血流变,以及肺组织病理观察肺部血栓情况。<br>  3.结果<br>  第一部分:<br>  (1)MPP小鼠外周血白细胞及中性粒细胞百分比升高,淋巴细胞百分比降低,随着时间的延长及经药物治疗后,各组指标均有不同程度改善,提示MPP有自限性,清肺通络方和阿奇霉素对外周血象均有改善作用,联合应用效果更好。<br>  (2)MPP小鼠BALF中白细胞及中性粒细胞百分比升高,淋巴细胞百分比降低,随着时间的延长及经药物治疗后,各组指标均有不同程度改善,清肺通络方和阿奇霉素对BALF中白细胞及分类均有改善作用,联合应用效果最好。<br>  (3)MPP小鼠BALF中MP均阳性,DNA基因拷贝数最高,随着时间的延长,部分转阴,且DNA基因拷贝下降,经药物治疗后均下降,清肺通络方与阿奇霉素无差异,联合应用效果最好。<br>  (4)MPP小鼠实验第5天肺间质炎症最重,经药物治疗炎症均减轻,清肺通络方优于阿奇霉素,联合应用效果最好。<br>  第二部分:<br>  (1)MPP小鼠BALF中IL-17、IL-6、TGF-β1水平均显著升高,经药物治疗均显著下降,且随着治疗时间的延长,各指标继续降低,清肺通络方对各指标的调节作用优于阿奇霉素,联合应用效果最好。<br>  (2)MPP小鼠肺组织RORγt、NF-κBp65蛋白表达均增高,清肺通络方对RORγt和NF-κBp65蛋白的调节作用均优于阿奇霉素,联合应用效果最好。<br>  第三部分:<br>  (1)MPP小鼠血小板升高,随着时间的延长或经药物治疗,血小板均下降,提示随着机体自身的修复作用,血瘀程度也有所改善,清肺通络方对血小板的降低作用优于阿奇霉素,联合应用无优效。<br>  (2)MPP小鼠全血高切(BVH)、低切粘度(BVL)升高,随着时间的延长,均无改善,清肺通络方对BVH和BVL的降低作用优于阿奇霉素,联合应用效果最好。<br>  (3)MPP小鼠实验第5天肺部充血最严重,伴有血栓形成,经药物治疗肺部充血均减轻,清肺通络方对血栓的改善程度优于阿奇霉素,联合应用效果最好。<br>  4.结论<br>  清肺通络方体内可清除MP,改善外周血及BALF白细胞计数及分类,调节MPP小鼠TH17细胞效应因子及其上下游转录因子,降低血小板,改善血液流变学,减轻肺部炎症及血栓情况。其在抗MP感染方面与阿奇霉素相当,但在调节TH17细胞信号途径、改善MPP血瘀程度方面均优于阿奇霉素,提示中药清肺通络方可能对防止MPP进展为哮喘、慢性咳嗽及肺纤维化方面有较好的预防作用,两者联合应用,效果更好。

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