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摘要胰腺癌(pancreaticductaladenocarcinoma，PDA)恶性程度高，预后差，早期诊断困难。超声内镜引导下细针穿刺活组织检查(endoscopicultrasonographyguidedfineneedleaspiration，EUS-FNA)是安全、有效的术前诊断方法，但由于穿刺活检获取的组织量少，有时会导致细胞学检查结果难以判断。基因mRNA表达水平检测灵敏度高，仅需要少量细胞即可进行检测。既往有研究表明S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σ基因mRNA表达水平在胰腺癌手术标本中升高，可能为PDA诊断的标记物。国内目前尚无EUS-FNA组织标本中S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σ基因mRNA表达水平检测用于PDA诊断的相关报道，本研究拟借助EUS-FNA技术术前获取胰腺组织标本，进行上述基因表达水平的检测，前瞻性地评价其对诊断PDA的临床价值。<br>　　 材料与方法:①收集36份PDA患者手术切除胰腺标本及44份相对正常胰腺标本。②抽提标本RNA进行逆转录。③行荧光定量PCR测定S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σ基因表达水平。④通过受试者工作特征曲线(ROC)分析确立S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σmRNA表达水平用于检测PDA的诊断界值。⑤通过免疫组织化学染色观察S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σ蛋白在PDA中的表达情况。⑥选取52例因胰腺占位行EUS-FNA的患者，评价EUS-FNA标本中S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σmRNA表达水平对PDA的术前诊断价值。<br>　　 结果:对52例EUS-FNA标本中的44例进行了RNA成功提取，成功率为84.62％(44/52)。44例均进行胰腺EUS-FNA检查，细胞学结果显示，恶性23例，可疑恶性及发现异形细胞者12例，良性9例。细胞学检测诊断PDA的敏感度、特异度、准确度分别为67.65％、100％及75％。<br>　　 PDA患者EUS-FNA标本和手术标本中S100A6mRNA表达水平(0.02242±0.03188，0.03803±0.08256)均显著高于相对正常胰腺组织(0.001646±0.001989)，差异有统计学意义(P＜0.0001，P＜0.0001)。PDA穿刺标本的S100A6表达水平显著高于胰腺良性病变穿刺标本(0.001611±0.002153，P＜0.0001)。EUS-FNA标本中S100A6mRNA表达水平＞0.005248为阳性诊断标准，前瞻性检测PDA的敏感度、特异度、准确度分别为88.24％、90％和88.64％。<br>　　 PDA患者EUS-FNA标本和手术标本中CEACAM6mRNA表达水平(0.001946±0.004217，0.001024±0.001753)均显著高于相对正常胰腺组织(0.00006482±0.00009272)，差异有统计学意义(P＜0.0001，P＜0.0001)。PDA穿刺标本的CEACAM6表达水平显著高于胰腺良性病变穿刺标本(0.00002777±0.00004587，P＜0.0001)。EUS-FNA标本中CEACAM6mRNA表达水平＞0.0001781为阳性诊断标准，前瞻性检测PDA的敏感度、特异度、准确度分别为64.71％，100％和72.73％。<br>　　 PDA患者EUS-FNA标本和手术标本中S100PmRNA表达水平(0.005270±0.007517，0.007745±0.01497)均显著高于相对正常胰腺组织(0.002076±0.008265)，差异有统计学意义(P=0.0004，P＜0.0001)。PDA穿刺标本的S100P表达水平显著高于胰腺良性病变穿刺标本(0.0001896±0.0002282，P=0.0009)。EUS-FNA标本中S100PmRNA表达水平＞0.001352为阳性诊断标准，前瞻性检测PDA的敏感度、特异度、准确度分别为52.94％，100％和63.64％。<br>　　 PDA患者EUS-FNA标本和手术标本中14-3-3σmRNA表达水平(0.0002452±0.0006186，0.00008247±0.0001156)均显著高于相对正常胰腺组织(0.00002942±0.00007045)，差异有统计学意义(P＜0.0001，P＜0.0001)。PDA穿刺标本的14-3-3σ表达水平显著高于胰腺良性病变穿刺标本(0.00003611±0.00009427，P=0.0016)。EUS-FNA标本中14-3-3σmRNA表达水平＞3.494×10-5为阳性诊断标准，前瞻性检测PDA的敏感度、特异度、准确度分别为47.06％，80％和54.55％。<br>　　 几种基因联合检测可以互补的提高诊断准确度，其中以S100A6+CEACAM6+S100P联合检测诊断准确度最高(97.73％)。细胞学+S100P+CEACAM6可以达到100％的诊断准确度。<br>　　 结论:本研究验证了S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σ基因mRNA在PDA中高水平表达。将EUS-FNA中S100A6、CEACAM6、S100P、14-3-3σ基因检测辅助细胞学检测，有助于提高胰腺癌术前诊断准确度。