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摘要类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种常见的慢性全身性自身免疫病。目前该病的发病机制尚未清楚。滑膜细胞增生，衬里层增厚是风湿性关节炎重要的病理特点。滑膜成纤维细胞(fibroblast-likesynoviocytes，FLS)是关节囊内侧滑膜衬里层的主要细胞。人们发现在病变的关节中出现成纤维细胞异常增生。如果能抑制成纤维细胞的增生，那么这对类风湿性关节炎的治疗有非常重要的意义。TRPM8通道是瞬时受体电位(transientreceptor potential，TRP)一种亚型，在调节细胞的存活和增殖起着重要的作用。TRPM8通道特异性地被冷刺激和薄荷醇(menthol)激活。TRPM8通道为非选择性阳离子通道，激活时主要引起Ca2+内流。实验室已经证明在大鼠滑膜成纤维细胞上表达有TRPM8通道，本文利用TRPM8特异性激动剂薄荷醇对滑膜细胞的增殖、胞内钙离子变化和活性氧水平的影响。<br>　　 利用单细胞钙离子荧光成像法检测薄荷醇刺激滑膜成纤维细胞胞内钙离子的动态变化。单细胞钙离子荧光成像实验结果表明：1、终浓度为0.1mM、0.2mM、0.5mM、1mM的细胞外menthol都能够引起成滑膜细胞[Ca2+]i的升高。并且menthol越高，引起细胞[Ca2+]i升高的幅度越大。2、在加入menthol刺激初始阶段，尤其是在0.5mM、1mM浓度组的实验中，细胞[ca2+]i会有一个明显的短暂而迅速的上升的过程(第一上升阶段)，接着进入一个稳定的过程(第二阶段)。为了得到TRPM8通道被激活的滑膜成纤维细胞的增殖和凋亡情况，采用了MTT比色法和Hoechst33342染色法。MTT比色法结果表明：分别用含100μM/L、500μ M/L、1000μ M/L浓度的薄荷醇培养基培养48h后，相对对照组的增殖率分别为(93.5±13.5)％、(86.34±5.9)％、(60.4±4.2)％。Hoechst33342法的结果表明：滑膜成纤维细胞在含有0.5mM薄荷醇的培养基培养48h后，细胞胞内核皱缩，呈凋亡现象。滑膜成纤维细胞上存在着活性氧(reactiveosygenspecies，ROS)引起的细胞凋亡途径。胞内氧自由基及其衍生物与细胞凋亡密切相关。使用二氢乙锭(Dihydroethidium，简称DHE)来检测胞内活性氧水平。实验表明：薄荷醇刺激的滑膜成纤维细胞胞内活性氧水平会上升。薄荷醇浓度越高，细胞内的活性氧水平越高。<br>　　 本论文结果表明：1.TRPM8通道活化能够抑制滑膜成纤维细胞的增殖：2.TRPM8的活化活化与[Ca2+]，升高有关系；3.TRPM8通道的活化与胞内活性氧水平的升高有关系。