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集胞藻6803中slr0815的功能分析

摘要过去的几十年,人们通过生物化学,反向遗传学以及结合晶体结构的分析得知,在蓝藻的类囊体膜上有五大光合复合体:PSⅠ,PSⅡ,Cytb6f, ATP合酶和NDH-1。这些蛋白复合体参与了生物体中两条比较重要的电子传递途径,即线性电子传递途径以及循环电子传递途径。这些复合体,是生物进化过程中阶段性的反应器,其在波动性的变化条件下,会调动一系列基因来抵抗波动环境。目前科学家们通过筛选各种突变体来研究各个复合体的组装调控的这一方向,已经成为热点。因此,筛选突变体研究光合复合体的调控组分是我们值得为之努力的方向。因此,我开展了我的课题研究。首先,在高光条件下,对集胞藻6803(Synechocystissp.strain PCC6803)转座子插入突变体库进行筛选,得到三个高光敏感的突变株。进一步研究表明,这三个高光敏感突变株NDH-CET的活性均受损,并且插入突变同一个未知基因——slr0815。为确定高光条件下的表型是否由此基因突变引起的,我们构建并获得了slr0815的互补株;通过生理功能的检测,我们进一步肯定了slr0815的突变损伤了NDH-CET的活性。其次,我们发现slr0815基因的缺失不影响NDH-1复合体的表达与组装,但是通过RT-PCR以及生物信息学的数据,slr0815与ndhL存在于一个操纵子中。这种特性可能对于复合体执行的呼吸,光合以及电子传递的三大功能起协调作用。但是此基因的突变严重影响了Cytb6f合体蛋白的积累。说明尽管其与ndhL存在于一个操纵子中,但是却对Cytb6f的影响更为严重。<br>   综上所述,本论文成功分析了slr0815的功能:<br>   (1)△slr0815严重影响了Cytb6f的蛋白积累,但是影响机制还有待于进一步的分析。<br>   (2)通过RT-PCR验证,slr0815与ndhL共同存在于一个操纵子中。

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