检索历史 清除

摘要在晚分泌期由于黄体功能的下降导致体内孕酮水平的降低称为孕酮撤退，孕酮撤退导致子宫内膜细胞经历一系列生化和细胞水平上的变化，最后发生凋亡和崩解，造成子宫内膜的出血和脱落，即所谓的月经发生。<br>　　 根据月经发生是否可被孕酮所逆转可将月经分为两个阶段:可被孕酮逆转的可逆阶段和和不可被孕酮逆转的不可逆阶段。前者为孕酮控制的信号通路，后者作为前者的后续阶段则触发了一系列组织崩解的作用因子。两阶段涉及完全不同的信号通路和级联反应体系。在人和灵长类解析上述分子机制有种种限制，因而如何获得适宜于进行活体研究的、廉价、易于操作的，特别是适合解析分子机理的动物模型是阐明月经发生机制的关键环节之一。因此确定小鼠月经模型中孕酮逆转的关键时期对于解析月经发生机制具有十分重要的意义。对此，我们进行了一些有益的探索，结果如下:<br>　　 1.通过阴道细胞学监测出血和组织形态学鉴定，成功确定了小鼠生理性孕酮撤退月经模型中能被孕酮逆转的关键时期为孕酮撤退后的12～16h。<br>　　 2.通过全基因组表达谱分析，比较小鼠生理性孕酮撤退模型中关键时期孕酮回植与孕酮撤退12h及16h的基因表达变化，找出差异表达基因，为后续研究提供导向。<br>　　 3.在基因芯片数据的指导下，选择了MMP家族的主要成员、环氧合酶-2(COX-2)、VEGF作为研究的靶分子，从mRNA、蛋白水平及蛋白表达定位几个层面，探讨了在月经发生的关键时期内表达水平的变化，并比较了在关键时期前后回植孕酮对这些分子表达的影响。结果表明:<br>　　 在月经发生的早期阶段，孕酮回植可以降低MMP-3、MMP-10、MMP-11 MMP-13及COX-2 mRNA和蛋白表达。<br>　　 在月经发生的晚期，在关键时期前的12h回植孕酮，MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-13和COX-2的mRNA和蛋白都受到强烈抑制;而关键时期后的16h回植孕酮则只能部分或不能减少这些MMP分子和COX-2的mRNA和蛋白的表达。<br>　　 MMP-7的mRNA和蛋白表达不能被孕酮回植所抑制。提示MMP-7可能和小鼠子宫内膜的崩解无关。<br>　　 VEGF mRNA和蛋白表达不受孕酮回植与否的影响，与其蛋白在小鼠子宫内膜的组织表达定位结果不符，这可能和VEGF表达的瞬时性增加有关。<br>　　 4.探讨了孕酮回植对小鼠子宫内膜基质细胞凋亡的影响，发现在月经发生的关键时期之前的12h回植孕酮可以有效阻断子宫内膜细胞的凋亡，而关键时期之后的16h则不能起到阻断效应。同时分析了孕酮对凋亡相关基因p53、mdm2、bcl-2、bax、fas、caspase-3及caspase-8的mRNA和蛋白水平的表达的影响，初步证实孕酮回植的抗凋亡效应可能通过上调bcl-2/bax的比值从而抑制caspase-3表达有关。