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摘要肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是我国最常见的恶性肿瘤之一，其以发病隐匿、预后差、死亡率高为主要特征。HCC的早期诊断是影响患者预后的重要因素之一。目前，现有的检测手段还不能有效的早期发现HCC，因此，找到一种早期诊断HCC的标志物就显得十分重要了。研究发现，microRNA(miRNA)在肝癌组织中异常表达，它可能参与了肝细胞癌变及肝癌转移的病理过程。HCC的发生发展与病毒性肝炎、肝硬化等慢性肝病有着密切的关系，探讨miRNA在人类乙型肝炎病毒相关肝癌组织中的作用将有重要的意义。<br>　　 目的:现有研究表明，多种miRNA的差异表达与HCC的发生发展密切相关。本研究拟通过对人类乙型肝炎病毒(HBV)相关HCC及其癌旁组织miRNA差异表达谱的研究，筛选与HCC特异的miRNA。<br>　　 方法:选取11例HCC患者的癌组织及其相应的癌旁组织，并提取各自的总RNA（包含miRNA），将11例癌组织和11例癌旁组织的总RNA分别混合在一起，作为各自反应的模板。利用RT2 miRNA PCR Array检测88个人类癌相关miRNA在癌组织与癌旁组织中的表达差异谱，以二者相对表达量的倍数变化在2倍及其以上，表示miRNA在癌及癌旁组织有差异，以癌组织/癌旁组织计算，倍数≥2表示高表达，倍数≤0.5表示低表达。进一步选取正常肝组织（5例）、慢性乙型肝炎组织(CHB)（5例）、HCC患者癌组织（12例）及其相应的癌旁组织（12例），分别提取各自的总RNA，然后采用TaqMan qRT-PCR法检测let-7a在各组织的表达量，并对筛选结果进行验证。<br>　　 结果:本研究所有实验均重复三次，综合分析筛选实验结果，在88个miRNA中，9个miRNA的扩增曲线或溶解曲线质量较差，予以剔除，则其余79个miRNA用于癌与癌旁组织间表达谱的分析。相对于癌旁组织，在癌组织中高表达的miRNA有9个，分别为miR-9、miR-25、miR-96、miR-183、miR-191、miR-372、miR-18a、miR-196a、miR-301a，其中miR-96、miR-183、miR-196a具有统计学意义(P＜0.05)，分别较其癌旁组织升高4.746、7.127、3.498倍;同时，9个miRNA在癌组织中低表达，分别为let-7a、let-7b、let-7c、let-7e、miR-100、miR-138、miR-214、miR-200c、miR-199a-3p，其中let-7c、miR-138具有统计学意义(P＜0.05)，分别较其癌旁组织降低3.945、4.790倍。另外，在79个质量好的miRNA中，有3个miRNA（miR-16、miR-21、miR-122）在癌组织及其相应的癌旁组织的相对表达量均高于其余76个miRNA。进一步以低表达的let-7a进行验证，正常肝组、慢乙肝组、癌旁组及癌组let-7a的相对表达量分别为1.071±0.401、0.926±0.477、0.881±1.214及0.535±0.719(P0.05)，虽无统计学差异，但从正常肝组织、慢乙肝组织、癌旁组织、肝癌组织中，let-7a的相对表达量呈现递减趋势。<br>　　 结论:本研究确定了HCC患者的癌组织与其相应的癌旁组织之间存在18个差异表达的miRNA，为进一步利用大样本开展miRNA作为诊断标志物的研究奠定基础。Let-7a的表达量逐渐下调的趋势，提示let-7a有可能参与了HCC的发生演变。