检索历史 清除

摘要[目的]<br>　　观察荷叶生物碱对人THP-1源性巨噬细胞LOX-1表达的影响，探讨荷叶生物碱抗动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的可能机制。<br>　　[方法]<br>　　1.用PMA诱导人单核细胞株THP-1分化为巨噬细胞后，分别与不同浓度ox-LDL（0mg/L，25 mg/L，50 mg/L，100 mg/L）孵育24h;提取总RNA和蛋白，分别用荧光定量PCR、Western blot分别检测细胞中LOX-1mRNA和蛋白质的表达。<br>　　2.用PMA诱导人单核细胞株THP-1分化为巨噬细胞后，随机分为五组:除单纯细胞组和单纯氧化低密度脂蛋白组，其余三组予不同浓度荷叶生物碱(25mg/L、50 mg/L、100 mg/L)孵育24h，然后荷叶生物碱干预组和单纯氧化低密度脂蛋白组予50 mg/Lox-LDL共同孵育24h;提取总RNA和蛋白，分别并用荧光定量PCR、Western blot分别检测细胞中LOX-1mRNA和蛋白质的表达。<br>　　[结果]<br>　　1.镜下观察到人单核细胞株THP-1在PMA诱导下由悬浮状态变为贴壁状态，且细胞形状由圆形变为梭形、椭圆形或不规则形，提示THP-1细胞已转化成巨噬细胞。<br>　　2.ox-LDL刺激组:荧光定量PCR及Western blot分别检测提示:与空白对照组比较，ox-LDL各剂量组皆可上调LOX-1mRNA及蛋白表达，在(0-50) mg/L剂量范围内呈明显的剂量-效应关系(P＜0.01)。<br>　　3.荷叶生物碱干预组:荧光定量PCR及Western blot分别提示:与单纯ox-LDL刺激组比较，荷叶生物碱处理组细胞LOX-1mRNA、蛋白表达呈浓度依赖性降低(P＜0.01）。<br>　　[结论]<br>　　1.ox-LDL上调人THP-1源性巨噬细胞LOX-1的表达，增加人THP-1源性巨噬细胞胆固醇蓄积，导致巨噬细胞泡沫化;并且这种作用随ox-LDL浓度的增加而增强;<br>　　2.荷叶生物碱下调人THP-1源性巨噬细胞LOX-1的表达，减少细胞胆固醇蓄积，减轻巨噬细胞泡沫化;并且这种作用随荷叶生物碱浓度的增加而增强。推测这可能是荷叶生物碱抗AS的机制之一。