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摘要目的:<br>　　从海洋生物Ⅰ号中提取、分离出抗肿瘤活性成分，研究其对人肝癌细胞系（HepG2）裸鼠移植瘤生长的影响及作用机制。<br>　　方法:<br>　　1.采用乙醇冷浸渍法和系统溶剂法从海洋生物Ⅰ号中提取，分离活性成分。<br>　　2.MTT法检测海洋生物Ⅰ号提取物体外对人肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用。<br>　　3.流式细胞术检测细胞DNA含量（分析细胞周期和凋亡），检测HepG2细胞的PCNA，Cyclin D1和CyclinA蛋白表达。<br>　　4.激光共聚焦扫描显微镜荧光定量法检测HepG2细胞PCNA蛋白的表达。<br>　　5.用皮下注射法建立人肝癌细胞系HepG2裸鼠移植瘤模型;通过腹腔给药途径和瘤近似体积测量，瘤倍增时间测定，瘤重测定，病理检验，免疫组织化学方法等来观察海洋生物Ⅰ号提取物对人肝癌细胞系HepG2裸鼠移植瘤生长的抑制作用。<br>　　结果:<br>　　1.新鲜的海洋生物Ⅰ号经乙醇冷浸渍法提取和系统溶剂液液萃取法分离得到石油醚提取物，乙酸乙酯提取物和水饱和正丁醇提取物，即提取物A、B和C，提取率分别是0.5％，0.2％和0.18％。<br>　　2.海洋生物Ⅰ号提取物体外对人肝癌细胞系HepG2生长抑制实验结果显示:提取物A、B、C在不同时间点对人肝癌HepG2细胞生长均有不同程度抑制作用，并呈现明显的时-效和量-效依赖性。但提取物B对人肝癌细胞系HepG2生长抑制作用最强，提取物C次之，提取物A作用最弱。<br>　　3.裸鼠实验结果显示:成功复制人肝癌细胞系HepG2裸鼠移植瘤模型，海洋生物Ⅰ号B提取物对人肝癌细胞系HepG2裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用，提取物B高，中，低剂量组的生长抑制率分别是34.07％，23.70％和21.04％。<br>　　4.流式细胞术检测HepG2细胞DNA含量（分析细胞周期和凋亡），检测 HepG2细胞的PCNA、Cyclin D1和Cyclin A蛋白表达量。检测结果显示:海洋生物Ⅰ号乙酸乙酯提取物能使人肝癌细胞系HepG2细胞周期阻滞于S期，随着提取物的浓度升高，S期细胞逐渐增多。HepG2细胞的PCNA蛋白表达水平随着提取物处理浓度的增高而增强。Cyclin D1和Cyclin A蛋白表达水平随着提取物处理浓度的增高而逐渐降低，与对照组比较均有显著性差异。<br>　　5.激光共聚焦扫描显微镜荧光定量法检测HepG2细胞PCNA蛋白表达，检测结果显示:海洋生物Ⅰ号提取物B能使HepG2细胞PCNA蛋白表达，阳性细胞核显绿荧光，随着提取物B的浓度升高，阳性细胞逐渐增多，荧光强度也增强，并且与对照组比较均有显著性差异。免疫组织化学方法测裸鼠移植瘤组织PCNA蛋白的表达，显示随着提取物B浓度的提高，裸鼠移植瘤组织PCNA染色表达增强，其中以提取物B高剂量组染色表达最高，为棕色深染。<br>　　结论:<br>　　1.海洋生物Ⅰ号提取物A，B、C在不同时间点对人肝癌细胞系HepG2生长均有不同程度抑制作用，并呈现明显的时-效和量-效依赖性。海洋生物Ⅰ号提取物B对人肝癌细胞系HepG2生长抑制作用最强，提取物C次之，提取物A作用最弱。<br>　　2.海洋生物Ⅰ号提取物B对人肝癌细胞系HepG2裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用。<br>　　3.海洋生物Ⅰ号提取物B对人肝癌细胞系HepG2生长抑制作用的机制可能与其使HepG2细胞周期阻滞于S期，PCNA蛋白表达水平增高，Cyclin D1和CyclinA蛋白表达水平降低有关。