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摘要目的：利用液质联用(Liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS)方法研究银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract，GBE)经正常及糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)病理状态下的肾小球系膜细胞(Mesangial cell，MC)转化后的量变及质变规律，探寻GBE防治DN的潜在生物活性成分。<br>　　方法：在高糖状态下建立肾小球系膜细胞增殖病理模型。用传代培养的大鼠MC同步化后分组:正常糖浓度组(NG组，5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG组，25 mmol/L葡萄糖)、GBE正常糖组(GBE-NG组，10 mg/mL GBE-NG-DMEM)、GBE高糖组(GBE-HG组，10 mg/mLGBE-HG-DMEM)。建立靶细胞生物转化技术，分别于细胞和药物共培养4h，8h，12h，16h，24 h，48 h后分别收集MC培养基质和细胞，利用LC-MS分别对细胞培养基质和细胞中的成分进行定量和定性分析。色谱柱:Kromasil-C18色谱柱(4.6×250mm，5μm);流动相:甲醇-0.1％甲酸水溶液，线性梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;自动进样器温度:4℃;进样量:10μL。柱后分流比1∶3进入质谱;ESI源;负离子模式检测;干燥气温度及流量:350℃，11 L/min;喷雾压力:20 Psi;毛细管电压:3000 V;碎片电压:110V。采用对照品对照、文献比对的方法定性鉴别细胞培养基质及细胞中，GBE经正常及高糖培养体系下MC不同时间生物转化后的化学成分，寻找可能存在的特异性成分或代谢产物。定量分析采用MS的多重反应监测（Multiple reactionmonitoring，MRM）定量分析模式，定量测定GBE经MC生物转化后指标性成分在细胞培养基质及细胞中的浓度。<br>　　结果：1.细胞培养基质中GBE成分的定量及定性分析<br>　　高糖及正常状态下的细胞培养基质中，48 h内选定的任何时间点均可以测到14种指标性成分。和低糖组比较，在高糖环境下，GB、染料木素的Tmax明显提前，提示细胞对这两种物质的生物转化速度加快。正常及高糖培养的MC培养基质中，发现了40个共有原型成分和不同时间出现及消失的7个代谢产物，推测出2个代谢产物。<br>　　2.细胞中GBE成分的定量及定性<br>　　高糖培养体系下的细胞中，48 h内选定的时间点均可以测到11种指标性成分;高糖培养下，除芦丁外，其他10种成分与细胞结合的达峰时间（Tmax）均明显推迟，尤其是GC、GB、BB、槲皮素、木犀草素、异鼠李素、山奈酚的Tmax均出现在培养48 h，槲皮苷及芫花素的Tmax推迟至24 h，芹菜素的Tmax推迟至12h;和正常糖组比较，细胞解离液中发现了19个GBE原型成分和5个代谢产物，推测出1个代谢产物。<br>　　结论：高糖的存在显著改变了GBE中化学成分的转化速度及与细胞结合的速度。高糖导致GBE的MC代谢产物发生变化。高糖状态下MC生物转化后的细胞中出现的19个原型成分及5个代谢产物均可能为GBE防治DN的潜在生物活性，尤其是GC、GB、BB、槲皮素、木犀草素、异鼠李素、山奈酚是GBE防治DN潜在活性物质的可能性更大。