蓝藻NDh-1复合体辅助蛋白Nsf的鉴定与功能分析-论文-万方医学网

蓝藻NDh-1复合体辅助蛋白Nsf的鉴定与功能分析

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摘要蓝藻NADPH脱氢酶复合体位于类囊体膜上，参与包括细胞呼吸、CO2吸收和围绕光系统Ⅰ的循环电子传递在内的多种生理功能，该复合体广泛存在于细菌、哺乳动物线粒体以及高等植物叶绿体中。近年来，人们在蓝藻NDH-1复合体结构组成、亚复合体的类型及其功能方面的研究中取得了一些进展，但就该复合体的成熟和组装过程方面而言，仅2013年有文献报道了在集胞藻6803中发现的一个与CRR6同源的蛋白Slr1097，该蛋白参与了蓝藻NADPH脱氢酶复合体中NdhI亚基的成熟。除此之外，对于蓝藻NDH-1复合体组装因子方面并没有其它报道。<br>　　利用高光对集胞藻6803的一个转座子突变体库进行筛选，我们得到了两个循环电子传递功能受损的突变株。实验发现这两个突变株都突变了同一个基因位点nsf。为了确定是否因为该基因的缺失导致了高光敏感的表型，我们构建了nsf缺失突变株。实验结果表明Nsf蛋白的缺失不仅导致高光敏感的表型，还严重影响了类囊体膜上Ndh亚基的表达量和NDH-1复合体的有效组装。此外，Nsf蛋白位于膜部分，但它并不是NDH-1复合体的亚基，而是作为一个辅助蛋白存在。并且在△nsf突变株胞质中Ndh亚基的表达量增多，大小约140kDa的组装中间体的积累量增多。这很可能是Nsf蛋白的缺失使NDH-1复合体在类囊体膜上变得不稳定，从而脱落到胞质中。<br>　　综上所述，本研究在集胞藻6803中鉴定到一个NDH-1复合体的辅助蛋白Nsf,该蛋白位于膜部分并且增强NDH-1复合体的稳定性。这一蛋白的缺失导致类囊体膜上Ndh亚基的表达量减少，严重阻碍了NDH-1复合体的有效组装，从而损伤了NDH所介导的循环电子传递活性，因而产生了突变株高光敏感的生长表型。