摘要小麦是世界主要粮食作物,亦是我国第二大粮食作物,培育高产、优质、多抗的小麦新品种始终是育种家的目标。HMW-GS是麦类作物储藏蛋白中的重要组成部分,对小麦加工品质有重要影响。本研究通过对59份河南省主要栽培品种(系)及后代进行了HMW-GS的SDS-PAGE鉴定,共检测到12种亚基和20种亚基组成。共46个小麦品种包含优质亚基,在Glu-A1位点优质亚基组合比例高于全国平均水平,而Glu-B1、Glu-D1位点优质亚基组合比例低于全国平均水平。仅有4个品种含有评分最高的组合“1Ax1,Bx7+By8,1Dx5+1Dy10”。因此在河南小麦品质育种中,应注重利用含有不同位点优质亚基的亲本材料配制杂交组合,从而选育出优质亚基聚合体,改良小麦的亚基组成,提高小麦品质。<br> 本文在使用SDS-PAGE分析上述小麦材料时,还发现其中存在着大量(25.42%)与1Dx5亚基SDS-PAGE电泳谱带相似的条带。这些过去被认为是1Dx5亚基(如温6)的储藏蛋白与1Dx5亚基极其相近,在SDS-PAGE中的迁移率略快于1Dx5亚基。经过Dx5分子标记检测以及SNP多态性引物Dx*检测,证实这类亚基不同于1Dx5亚基,对其序列信息分析后发现与AegilopstauschiiHMW-Dtx2等位基因、Triticumaestivum株系SQ-884、SQ-188、SQ-783、SQ-180、SQ-659高分子量麦谷蛋白亚基Dtx5等位基因相似程度为100%,与小麦1Dx5亚基对应基因相似程度为99%。同时实验使用的Dx*引物可以作为Dx5分子标记的阴性对照使用,排除由于实验错误导致的假阴性,提高分子标记检测的准确性。<br> 本文还对小麦品种偃展99(98)1Ay假基因完全序列进行了克隆测序,与NCBI数据库相关信息比对发现,其与二倍体、四倍体小麦品种1Ay假基因有极近的亲缘关系。<br> 分子标记辅助选择是对传统育种方式的有效补充。传统的育种主要依赖于植株的表现型选择。对植株抗病性、品质、产量等性状的选择、鉴定工作十分困难。而利用分子标记进行MAS育种不仅可以通过与目标基因紧密连锁的分子标记在早世代对目的性状进行选择,同时,也可以利用分子标记对轮回亲本的背景进行选择。因此,建立高效、经济、准确的分子标记检测平台将为推广分子标记辅助选择技术起到重要作用。本文通过搜集对照材料、优化PCR反应条件,建立了包含小麦品质、抗性的26个质量性状分子标记筛选平台。应用该平台对59份河南省小麦主要栽培品种(系)的相关性状基因进行分子标记检测,获得了较为满意的结果,为后续分子标记辅助选择工作的推广应用提供了参考。同时在实验过程中改进了(非)变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法的一些细节,提高了分子标记筛选的效率。
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